Лабораторная диагностика трихомониаза

Содержание

Диагностика трихомониаза: методы и стоимость исследований

Трихомониаз — самое распространенное заболевание, предающееся половым путем . Он встречается чаще, чем сифилис и гонорея, вместе взятые . Это заболевание часто протекает бессимптомно и приводит к серьезным осложнениям. Поэтому так важно знать, как вовремя выявить трихомониаз и какие анализы нужно сдать, чтобы его обнаружить.

Трихомониаз — это заболевание мочеполовой системы, которое вызывает небольшое одноклеточное простейшее трихомонада.

Трихомонада — крайне нестойкий организм. Она не переносит высушивания, на влажном белье может сохраняться всего 2–3 часа, и даже водопроводная вода убивает ее всего за несколько минут . То есть заразиться трихомониазом бытовым путем практически невозможно. Для этого обязательно нужен половой контакт.

Немного статистики
По данным ВОЗ, каждый год в мире трихомониазом заражаются около 143 миллионов человек . В России в 2015 году такой диагноз был установлен у 92,1 тысячи человек .

По данным исследователей, в разных странах трихомонаду выявляют у 2–85% мужчин и 12–65% женщин, которые обратились по поводу уретритов и других воспалительных заболеваний мочеполовой системы. Ученые объясняют такую разницу в показателях точностью лабораторной диагностики трихомониаза .

Если брать российские данные, то трихомонадная инфекция составляет около 34,8% случаев негонококкового уретрита у мужчин и 20–40% обращений среди пациенток гинекологических клиник .

Показания к назначению анализа на трихомониаз

Трихомониаз не всегда вызывает клинически выраженное заболевание. У женщин до половины случаев заражения могут протекать бессимптомно. И выявляется это заболевание уже при обследовании по поводу осложнений — бесплодия, невынашивания беременности, сальпингоофорита, эндометрита . Трихомонады увеличивают риск заражения ВИЧ-инфекцией и риск развития рака шейки матки .

Из-за трихомониаза в половых путях и в уретре развивается воспалительная реакция, появляются микроскопические кровоизлияния. Это нарушает естественный защитный барьер и делает организм более восприимчивым к любым другим инфекциям. Лейкоциты и другие иммунные клетки мигрируют в очаг поражения, где создается их большая концентрация. А именно эти клетки в первую очередь поражает ВИЧ-инфекция. И от того, насколько высока их концентрация в месте соприкосновения с вирусом, зависит вероятность заражения .

Симптомы трихомониаза у женщин — болезненность и дискомфорт внизу живота, которые усиливаются при половых контактах или при мочеиспускании. Появляются выделения желтоватого цвета из половых путей. Часто эти выделения имеют пенистый вид и неприятный запах.

У мужчин появляются слизистые выделения из уретры, боль во время мочеиспускания и половых контактов. Основными осложнениями этой инфекции для мужчин являются простатит и везикулит . В одном из исследований было доказано, что именно трихомонада стала причиной хронического простатита у 29% пациентов .

Российское общество дерматовенерологов и косметологов советует проводить диагностику трихомониаза :

  • при воспалительных урологических и гинекологических заболеваниях;
  • при обследовании партнеров во время планирования беременности;
  • во время самой беременности;
  • перед урологическими и гинекологическими операциями;
  • при бесплодии;
  • после незащищенного полового контакта.

Методы лабораторной диагностики трихомониаза

Для выявления трихомонады используют четыре типа методов: микроскопический, культуральный, молекулярно-генетический и серологический. Для того чтобы установить диагноз, достаточно обнаружить этот микроорганизм хотя бы одним из первых трех методов .

Микроскопия — это выявление трихомонады в мазках. Биологический материал наносят на предметное стекло и исследуют его под микроскопом.

В первый час после взятия материала исследуют нативный или «влажный» мазок, то есть материал без окраски. В нем можно выявить подвижные клетки трихомонады. Этот метод особенно эффективен при остром заболевании. В этом случае его чувствительность достигает 70%, а специфичность — 100% . Если прошло больше времени с момента взятия биоматериала или заболевание протекает в скрытой форме, то шанс найти подвижные клетки гораздо меньше, в среднем от 30 до 70% .

Кроме исследования влажного мазка материал могут обрабатывать различными красителями. В этом случае врач ищет под микроскопом клетки определенного размера со специфической окраской и формой.

Для диагностики трихомониазной инфекции есть свой «золотой стандарт». Это микробиологическое исследование , при котором биоматериал помещают на питательную среду (посев).

Этот метод применяют, когда заболевание не сопровождается ярко выраженными симптомами . Его также используют как второй этап диагностики, если микроскопический метод не дал результата. Чувствительность этого метода достигает 95% . Из минусов можно отметить длительность исследования.

Молекулярно-генетические методы — это различные виды ПЦР, NASBA и других реакций, которые выявляют участки ДНК или РНК в биоматериале. ПЦР обладает меньшей чувствительностью, чем культуральный метод, порядка 88–97% . А по некоторым данным — от 55 до 95% .

ПЦР желательно применять вместе с культуральным исследованием. Это значительно повышает вероятность выявления болезнетворного микроорганизма.

Серологическое исследование , то есть определение в крови антител к трихомонаде, используется как дополнение к первым трем методам. Если коротко, то сдать анализ крови на трихомониаз можно, но его результаты нужно оценивать только комплексно с учетом других исследований.

Его недостатком является возможность ложных положительных и ложноотрицательных реакций. Из положительных моментов — антитела сохраняются длительное время, около 1 года после заражения . То есть даже спустя год можно определить, что человек перенес трихомониаз.

Подготовка к исследованию и забор биоматериала

Для определения уровня антител понадобится кровь, для проведения всех остальных исследований чаще всего берут соскоб из уретры. У женщин также могут брать материал из влагалища или из цервикального канала — здесь концентрация трихомонад будет самая высокая.

Мужчинам перед взятием анализа на трихомониаз нужно не мочиться около двух–трех часов. Для женщин правил несколько больше. Обследование не проводится во время месячных или накануне, после кольпоскопии или вагинального УЗИ. За 1–2 дня до обследования желательно не использовать свечи, спринцевания и воздержаться от половых актов. Все эти процедуры нарушают состав микрофлоры, и исследование может получиться неточным.

Для проведения ПЦР кроме соскоба можно использовать первую порцию утренней мочи или сперму. Собрать сперму или мочу нужно в специальный стерильный контейнер.

Сколько времени делается анализ на трихомониаз и как расшифровать результаты

Из всех анализов на трихомониаз самый быстрый — микроскопия нативного мазка. В идеале она должна проводиться через 10 минут после взятия материала. За это время трихомонады не успевают потерять свою подвижность и сохраняют типичную форму . То есть уже примерно через час врач может дать предварительный результат.

В реальности такое возможно в гинекологических или урологических клиниках, при которых есть своя лаборатория с возможностью проводить микроскопическое исследование.

Окрашенные мазки не требуют такой срочности анализа. Поэтому результат будет готов на следующий день или через день.

Это важно
Кроме трихомонад в мазке могут обнаружить косвенные признаки воспаления — большое количество слизи или скопление лейкоцитов на поверхности эпителиальных клеток , дрожжевые клетки, гарднереллы, лактобактерии и кокковую флору.

Результаты ПЦР-исследования обычно можно получить через 1–2 рабочих дня. При обнаружении трихомонад результат могут задержать для постановки подтверждающих проб. Положительный результат выдают при обнаружении этих микроорганизмов, отрицательный — при их отсутствии.

Диагностика трихомониаза культуральным методом — самая долгая. Она может занимать более недели. За это время исследуемый материал помещают на питательную среду, следят за ростом микроорганизмов на ней, проводят повторное определение возбудителя. Идеальный вариант — отсутствие роста. Это означает, что в собранном материале не было живых трихомонад. Если, конечно, были точно соблюдены все требования по забору биоматериала, его хранению и транспортировке. Положительный результат анализа на трихомониаз говорит о заражении.

Анализ крови на трихомониаз проводится в течение 1–2 рабочих дней. Положительный результат говорит о том, что в крови есть антитела, то есть пациент или болеет трихомониазом, или перенес его в прошлом. Отрицательный результат — отсутствие заболевания или низкий уровень антител. Сомнительный — это пограничный результат, который сложно интерпретировать. В таком случае обычно рекомендуют повторить исследование через 1–1,5 недели.

Сколько стоит анализ на трихомониаз

Стоимость анализа на трихомониаз зависит от метода исследования и метода забора материала. Например, в Москве стоимость забора мазка из уретры или из влагалища — около 400 рублей. За взятие крови возьмут 150–200 рублей. А при сдаче мочи или спермы доплачивать не придется, стоимость контейнера обычно уже включена в цену исследования.

Микроскопия мазка будет стоить от 450 до 600 рублей в зависимости от лаборатории. ПЦР-исследование — 300–450 рублей вне зависимости от вида материала. Анализ на трихомониаз культуральным методом выполняется не во всех клиниках и стоит от 800 до 1300 рублей . А серологическая диагностика трихомониаза по крови обойдется примерно в 600–800 рублей.

Трихомониаз — это венерическое заболевание, которое часто протекает бессимптомно и является причиной серьезных осложнений. Лабораторная диагностика трихомониаза позволяет выявить это заболевание даже в стертой форме и вовремя начать лечение. А лучшей профилактикой любых половых инфекций остается использование барьерных методов контрацепции.

Источники:

Урогенитальный трихомониаз: Лабораторная диагностика

Опубликовано в:
УРОГЕНИТАЛЬНЫЙ ТРИХОМОНИАЗ
Пособие для врачей
Санкт-Петербург — Великий Новгород, 2007

Принципы лабораторной диагностики мочеполового трихомониаза

1. Лабораторные методы исследований

Материалом для паразитологических исследований у женщин служит отделяемое из цервикального канала, смыв из влагалища и осадок мочи; у мужчин — отделяемое из уретры, центрифугат свежевыпущенной мочи, секрет предстательной железы и эякулят.

Накануне обследования женщинам в течение суток не рекомендуется делать спринцеваний. Материал для анализа берется у них со слизистой заднего свода влагалища. В некоторых случаях исследуется отделяемое из цервикального канала.

Мужчинам перед обследованием предлагается в течение 3-4 ч воздерживаться от мочеиспусканий. Материал из уретры у них забирается с глубины 5-7 см специальным зондом или ложкой Фолькмана. Исследуется также секрет предстательной железы и эякулят. Если речь идет о хронической трихомонаднои инвазии, накануне исследования рекомендуется сделать провокацию гоновакциной, пирогеналом или неспецифическую (алкогольную).

1.1. Диагностика мочеполового трихомониаза

Диагностика мочеполового трихомониаза проводится путем микроскопии нативных препаратов, а также мазков, окрашенных метиленовым синим, по Романовскому-Гимзе и по модифицированному способу Грама. Для обнаружения трихомонад в нативных препаратах исследуется эякулят, секрет предстательной железы и осадок мочи у мужчин и смыв из влагалища у женщин.

Исследование нативных препаратов

Нативные препараты готовятся и исследуются сразу же после взятия материала. Если это невозможно, материал помещается в питательную среду, обеспечивающую кратковременное сохранение трихомонад, из расчета 1 мл исследуемого материала на 5 мл среды. Материал должен быть доставлен в лабораторию в теплом виде, сроки доставки материала не должны превышать 2 часов.

Для приготовления препарата на предметное стекло наносится капля теплого изотонического раствора хлорида натрия или раствора Рингера-Локка, с которой смешивается исследуемый материал. Взвесь накрывается покровным стеклом и микроскопируется при увеличении объектива 40 и окуляра 7 или 10.

При изучении нативного препарата особое внимание обращается на размеры и форму трихомонад, характер их движения, внутреннее содержимое клеток. В типичных случаях трихомонады обнаруживаются в виде подвижных образований грушевидной, реже овальной формы, размером в среднем от 13 до 17мкм. Характер их движений толчкообразный. Иногда удается заметить движение свободных жгутиков. Ядра трихомонад чаще не обнаруживаются или плохо различимы. Цитоплазма трихомонад обычно зернистая, чаще вакуолизирована.

Наиболее часто в настоящее время встречаются округлые или овальные, слабоподвижные или неподвижные (амастиготные) формы, которые следует отличать от лейкоцитов — сегментоядерных нейтрофилов, а также «голых ядер» эпителиоцитов и клеток молодого эпителия. В этом случае ведущими диагностическими критериями являются размеры трихомонад (чаще от 13 до 17 мкм), диффузная зернистость цитоплазмы, наличие в ней вакуолей, а также отсутствие хорошо различимого ядра.

Размеры лейкоцитов, имеющих округлую, реже овальную форму, как правило, не превышают 10 мкм. Цитоплазма лейкоцитов прозрачна, зернистость обычно не отмечается или слабо выражена. Сегментоядерные нейтрофилы обычно содержат хорошо различимое сегментированное ядро.

Голые ядра эпителиоцитов отличаются от трихомонад относительно толстой оболочкой (кариолеммой) и иным характером зернистости (отдельные глыбки хроматина). В клетках молодого эпителия, даже если они по размерам соответствуют трихомонадам и обладают зернистостью, всегда прослеживается четко различимое округлое или овальное ядро.

В некоторых случаях обнаруживаются амебоидные формы Т. vaginalis, длина тела которых достигала 30 мкм, а также атипично делящиеся (почкующиеся) клетки. Основными дифференциально-диагностическими критериями, отличающими атипичных трихомонад от клеток эпителия и лейкоцитов, служат наличие в цитоплазме этих простейших выраженной зернистости и вакуолей, а также отсутствие хорошо различимого ядра. Кроме того, они значительно крупнее, чем наиболее часто встречающиеся форменные элементы — сегментоядерные нейтрофилы. По размеру такие трихомонады могут быть сопоставимы с моноцитами, которые, в отличие от них, имеют четко выраженное ядро и никогда не встречаются в значительных концентрациях (несколько клеток в каждом поле зрения). При отсутствии типичных форм клеток трихомонад диагноз трихомониаза может считаться лишь предположительным и должен подтверждаться другими методами.

Исследование нативных препаратов обычно сочетают с микроскопией окрашенных мазков при увеличении объектива 90 (масляная иммерсия) и окуляра 7 или 10. Исследование окрашенных мазков несколько повышает вероятность обнаружения трихомонад за счет учета не только подвижных, но и неподвижных клеток. Кроме того, при просмотре окрашенных мазков лучше выявляется ряд вспомогательных признаков, которые косвенно указывают на наличие воспалительного процесса. К ним относятся скопление лейкоцитов на клетках плоского эпителия или вокруг них; большое количество слизи в мазках, наличие безъядерных клеточных образований и «голых» ядер эпителиальных клеток в цервикальном отделяемом и др.

Окраска метиленовым синим

Готовится 1% водный раствор метиленового синего. Высушенный на воздухе мазок фиксируется в течение 3 мин 96% этиловым спиртом, высушивается, после чего на него наносили на 1 мин раствор метиленового синего. Оставшийся краситель осторожно смывается слабой струей холодной воды и мазок высушивается.

Трихомонады в препарате имеют округлую или овальную форму, с интенсивно окрашенными в синий цвет ядрами; цитоплазма клеток светло-синяя, с нежной сетчатой структурой, вакуоли — бесцветны.

Окраска по Романовскому-Гимзе

Высушенный на воздухе мазок фиксируется смесью Никифорова (абсолютный этиловый спирт и эфир в соотношении 1:1). Раствор краски Романовского (азур-эозин) перед употреблением разводится дистиллированной водой в соотношении 0,3 мл на 10 мл воды и пипеткой наносится на горизонтально расположенные препараты на 30-40 минут. Затем они быстро промываются водой и высушиваются.

В окрашенных препаратах трихомонады имеют эксцентрично расположенное овальное пурпурно-фиолетовое ядро. Цитоплазма клеток окрашивается в светло-синий цвет, вакуоли остаются бесцветными, оболочка клеток четко заметна.

Окраска по модифицированному способу Грама

Для окраски используются следующие реактивы:

  1. 1% раствор генцианвиолета (1 г генцианвиолета растворяется в 100 мл кипящей дистиллированной воды, полученный раствор пропускается в горячем виде через бумажный фильтр).
  2. Водный раствор Люголя (2 г калия йодида растворяется в 300 мл дистиллированной воды, к полученному раствору добавляется 1 г чистого йода, после чего раствор фильтруется через бумажный фильтр).
  3. 3,96% этиловый спирт.
  4. 1% водный раствор нейтрального красного (1 г нейтрального красного растворяется в 100 мл дистиллированной воды и пропускается через бумажный фильтр).

Препарат накрывается полоской фильтровальной бумаги и заливается раствором генцианвиолета на 1-2 мин, после чего бумага снимается, препарат осторожно промывается водопроводной водой и на несколько секунд заливается раствором Люголя (до почернения мазка). Остаток раствора смывается, препарат обесцвечивается в 96% этиловом спирте до тех пор, пока с тонких участков препарата перестают стекать фиолетовые струйки. После смывания спирта водой препарат сразу же докрашивается в течение 3 мин раствором нейтрального красного, затем тщательно промывается и высушивается.

При микроскопии окрашенных мазков ядра клеток Т. vaginalis окрашиваются в фиолетовый цвет, цитоплазма — в красно-оранжевый цвет разной интенсивности. Метод окраски по Граму позволяет также диагностировать гонорею. В некоторых случаях для подтверждения диагноза трихомониаза используется ПЦР и культуральный метод.

Культуральный метод

Нами Т. vaginalis выращивается на питательной среде СДС-199 М (Захаркив Ю. Ф. и др., 1998), которая имеет следующий состав:

  1. 100 мл солевого раствора (натрия хлорида 6,5 г, калия хлорида 0,14 г, кальция хлорида 0,12 г, натрия бикарбоната 0,2 г, 0,5 мл 0,2% раствора метиленового синего, дистиллированной воды до 1 л);
  2. 20 мл среды 199;
  3. 450 мг солянокислого цистеина;
  4. 30 мл сыворотки крови эмбрионов телят (без консерванта);
  5. 10 мл 20% раствора мальтозы;
  6. тиамина хлорида 5% и пиридоксина гидрохлорида 5% по 0,25 мл и аскорбиновой кислоты 5% — 0,5 мл на 100 мл среды;
  7. ампициллина натриевой соли 125 000 ЕД и гентамицина 40 000 ЕД на 100 мл среды.

Солевой раствор автоклавируется при 120°С в течение 30 минут, остальные ингредиенты добавляются стерильно после охлаждения среды. Антибиотики и витамины добавляются в питательную среду непосредственно перед использованием. Среда должна быть светло-зеленого цвета, прозрачной; показатель рН среды должен составлять 5,5-6,0.

Питательная среда объемом 4,5 мл помещается в стерильные пробирки и заливается слоем стерильного вазелинового масла толщиной 5 мм для создания анаэробных условий культивирования трихомонад. Посев производится пастеровской пипеткой путем помещения 0,5-1,0 мл исследуемого материала на дно пробирок.

Микроскопическое исследование производится через 48 и 96 часов после посева. При положительных результатах трихомонады дают придонный рост в виде плотного беловатого осадка, из которого пастеровской пипеткой берется материал для микроскопического исследования.

2. Определение чувствительности Trichomonas vaginalis к метронидазолу

В 1962 году S. Squires and J. A. Fadzean для определения чувствительности Т. vaginalis предложили метод серийных разведений метронидазола в жидкой питательной среде в анаэробных условиях. В качестве критерия оценки чувствительности они использовали минимальную ингибирующую концентрацию (MIC), под которой понимали наименьшую концентрацию препарата, вызывающую иммобилизацию у 100% клеток трихомонад. С помощью указанной методики авторам удалось показать, что все изученные ими штаммы Т. vaginalis, выделенные от больных трихомониазом, были чувствительны к метронидазолу в диапазоне концентраций препарата от 0,25 до 1 мкг/мл.

2.1. Определение чувствительности Trichomonas vaginalis к антипротозойным препаратам in vitro при использовании критерия иммобилизации трихомонад

Чувствительность штаммов Т. vaginalis к метронидазолу определяется с помощью метода серийных разведений препарата в питательной среде СДС-199 М. При использовании критерия оценки чувствительности штаммы Т. vaginalis, используемые для исследования, должны содержать не менее 90% подвижных клеток.

Среда заливается по 4,0 мл в стерильные пробирки, затем в них вносится 0,5 мл раствора, содержащего разные концентрации метронидазола (или другого антипротозойного препарата): от 0,25 до 1000 мкг/мл (1 мг/мл).

После этого в пробирки вносится 0,5 мл культуры возбудителя с заранее определенной концентрацией клеток (кл./мл). Контролем служит среда без препарата. Затем для создания анаэробных условий, необходимых для культивирования Т. vaginalis, в пробирки со средой вносится вазелиновое масло (толщина слоя — 0,5 мм). Пробирки с исследуемым материалом инкубируются в термостате при t = 37°С. Учет результатов производится через 48 и 96 часов после посева.

Чувствительность трихомонад к метронидазолу оценивается путем определения минимальной ингибирующей концентрации (MIC), вызывающей иммобилизацию всех клеток Т. vaginalis. К лекарственно-устойчивым относятся штаммы, у которых иммобилизация обнаруживается при концентрациях метронидазола (или другого антипротозойного препарата), превышающих 15 мкг/мл.

2.2. Определение чувствительности Trichomonas vaginalis к антипротозойным средствам in vitro при использовании критерия лизиса трихомонад при терапевтически эффективных концентрациях препаратов

В связи с широким распространением штаммов Т. vaginalis, устойчивых к метронидазолу, особенно среди больных хроническим мочеполовым трихомониазом, а также высокой частотой встречаемости амастиготных клеток, мы предлагаем оценивать чувствительность трихомонад к широкому спектру антипротозойных препаратов (производным 5-нитроимидазола пролонгированного типа действия (тинидазол, ниморазол, орнидазол и секнидазол), 4-аминохинолина (хлорохин, син. делагил) и нитрофурана (нифуратель, син. макмирор)) на основе оценки лизиса клеток трихомонад.

Чувствительность трихомонад оценивается при концентрациях препаратов, соответствующих терапевтически эффективным, т. е. создаваемым в сыворотке больного при пероральном назначении стандартных схем препарата. Среда разливается по 700 мкл в стерильные пробирки «Эппендорф», а затем в них вносится 200 мкл раствора димексида (диметилсульфоксида), содержащего антипротозойный препарат в концентрации, в 5 раз превышающей терапевтически эффективную. В контрольную пробирку помещается только 200 мкл димексида. Затем в пробирки осуществляется посев 100 мкл исследуемого материала. Учет результатов производится через 48 и 96 часов после посева.

К высокоустойчивым (RIII) относятся штаммы, концентрация клеток которых в опытных пробирках с антипротозойным препаратом составляла не менее 50% по сравнению с контролем; к умеренно устойчивым (RII) — от 25 до 50%, к низкоустойчивым (RI) — менее 25%. Воздействие препарата считается оптимальным при лизисе всех клеток трихомонад; в этом случае штамм относится к чувствительным (S). По нашему мнению, именно такой подход позволяет подобрать препарат или комбинацию препаратов для назначения рациональной схемы этиотропной терапии.

2.3. Определение чувствительности Trichomonas vaginalis к метронидазолу in vivo и текущий контроль эффективности этиотропной терапии

Определение чувствительности Т. vaginalis к метронидазолу in vivo проводится с помощью метода, основанного на установлении сроков исчезновения паразитов из исследуемого материала у больных трихомониазом на фоне этиотропной терапии. Паразитологические исследования материала проводят на 1,3, 5 и 7-й дни с момента начала лечения. Лекарственно-чувствительными считаются штаммы, которые перестают выделяться от больных на 2-5-е сутки с момента начала этиотропной терапии.

УРОГЕНИТАЛЬНЫЙ ТРИХОМОНИАЗ
Пособие для врачей
Санкт-Петербург — Великий Новгород, 2007

Далее «» Глава 4. Клиника 1 сентября 2009 г.

Диагностика трихомониаза

Трихомониаз- инфекционное заболевание, передающееся половым путем. Несмотря на то, что трихомониаз — наиболее распространенная венерическая болезнь, его диагностика требует самого серьезного подхода. Возбудитель – влагалищная трихомонада, протозойная (простейшая) одноклеточная форма жизни.

Существуют три типа трихомонад.

Они паразитируют в рту, желудочно-кишечном тракте, в анаэробной среде влагалища, предстательной железы, семенных пузырьках и мочеиспускательном канале.

Последняя вызывает урогенитальный трихомониаз.

Трихомонада не принимает форму цисты, соответственно, не способны существовать вне человеческого тела.

Очевидно, что для данной инфекции возможен исключительно половой путь передачи инфекции.

Инкубационный период колеблется от 3 до 30 дней.

Трихомониазом можно болеть несколько раз в жизни, так как иммунитета к данной протозойной инфекции не существует.

Клиническая диагностика трихомониаза

Многоочаговость трихомонадного поражения определяет разнообразие клинической картины.

При торпидной форме: скудные выделения из мочеиспускательного характера, легкая дизурия или отсутствие клинических проявлений

При каких симптомах сдают анализы на трихомониаз?

  • Трихомонадный уретрит у мужчин:
  • Обильные гнойные или грязно-желтые выделения;
  • Режущая боль при мочеиспускании;
  • Моча мутная, с хлопьями.

Тотальный трихомонадный уретрит

  • + учащенные мочеиспускания;
  • + гематурия.

Трихомониаз у женщин складывается из вагинита, уретрита, эндоцервицита и эндометрита.

  • Большое количество зловонных, раздражающих выделений;
  • Постоянный зуд и экскориации в области гениталий;
  • Мацерации и опрелости в промежности;
  • Дизурия (жгучая боль при попытках помочиться)

Трихомониаз у девочек протекает в форме трихомонадного вульвовагинита.

В дополнение к клинике женского трихомониаза:

  • Покраснение и отечность наружных половых органов, бедер и промежности;
  • Эрозии и язвочки в области вульвы и влагалища;
  • гнойные белесые выделения пенятся и вызывают раздражение кожи;
  • Гнойные, пенистые, жидкие раздражающие выделения;

Свежий трихомониаз может перейти в хроническую форму, когда периоды бессимптомного течения сменяются обострением.

Факторы риска обострения:

  • половое возбуждение и коитус;
  • изменения гормональной функции яичников;
  • прием алкоголя;
  • изменение pH влагалища

Если все так очевидно, то зачем же нужна диагностика?

Существуют транзиторные формы заболевания, бессимптомное носительство, малосимптомное течение.

Для успешного лечения необходима точная диагностика.

Без лечения трихомониаз может привести к следующим осложнениям:

  • Простатит
  • Везикулит
  • Стриктуры уретры
  • Рак шейки матки
  • Риск развития других ЗППП, в том числе ВИЧ

Трихомониаз: методы диагностики

Постановка диагноза трихомониаза опирается на клинические и лабораторные методы диагностики.

Клинические методы информативны в острой фазе.

При подостром, торпидном и хроническом течении, а также носительстве врач-венеролог опирается преимущественно на данные лабораторных тестов.

Применяют 4 лабораторно-диагностических метода:

  • микроскопический,
  • культуральный,
  • иммунологический,
  • генодиагностический.

Анализ на трихомонады также выполняется совместно с анализом на гонорею.

Культуральный метод и микроскопия при трихомониазе

Безусловным доказательством трихомониаза служит обнаружение простейших, в частности, урогенитальных трихомонад, в естественных биологических материалах.

Широко применяются мазки и микроскопия нативных препаратов влагалищных смывов, эякулята, осажденной мочи.

Культуральный способ диагностики (посев, мазок на флору)

Забор материала у женщины:

  • Стенка цервикального канала. Мазок берет врач-гинеколог (венеролог) или акушерка. Стерильный тампон вводят в полоть шейки матки, извлекают и аккуратно упаковывают в стерильную пробирку.
  • Влагалище. Мазок выполняется стерильным тампоном, которым врач или акушерка проводят по стенке влагалища. Тампон помещается в стерильную пробирку.
  • Анализ мочи. Сплошная порция мочи собирается в стерильную посуду.

Внимание! накануне сбора анализа на чувствительность, «на флору» – за сутки запрещено подмываться, принимать ванну и душ. Стерильный тампон с материалом или моча помещаются в стерильную, герметично закрывающуюся пробирку и быстро доставляются в лабораторию для выполнения анализа

Забор материала у мужчины:

  • Анатомия мужского организма снижает риск заражения, но абсолютно не способна его исключить. Забор материала на диагностические исследования проводится в условиях медицинской организации врачом урологом или венерологом.
  • Забор эякулята производится в стерильную банку. По завершении мастурбирования выделившийся эякулят собирается в стерильную пробирку.
  • Моча сдается по тому же принципу, что и у женщин, в стерильную посуду.
  • Секрет предстательной железы врач собирает на стерильный тампон или предметное стекло после ректального массажа простаты.
  • Стерильный тампон с материалом или моча в стерильной, герметично закрывающейся пробирке срочно доставляются в лабораторию для выполнения анализа

Содержимое пробирок помещается на растущий куриный эмбрион/ куриный бульон или одну из специфических питательных сред.

Где в особых условиях изучается рост колоний простейших.

Дополнительные сапрофитные (безопасные) и условно-патогенные микроорганизме также станут прорастать.

Поэтому такой мазок называют мазком на флору.

Посев на чувствительность (обычно к метронидазолу (трихополу) или иным антипротозойным средствам) выполняется «ин витро», то есть в пробирке или чашке Петри.

Штаммы («породы») микроорганизмов в каждом поколении дают новые свойства.

Например, устойчивость к воздействию фармакологического препарата.

Поэтому наилучший клинический результат обеспечивается назначением терапии по результатам посева на чувствительность.

Лаборант наносит на чашку Петри разные лекарственные средства в обычной концентрации.

Спустя несколько дней изучает, каким оказался рост колоний под воздействием «лечения».

Неправильно именовать исследование устойчивым оборотом «бакпосев».

Так как никаких сопутствующих бактерий при исследовании на трихомониаз встретить мы не планируем.

В то же время трихомониаз коморбиден (родственен) иным заболеваниям с половым путем передачи.

Поэтому посев на наличие простейших сочетается с бактериальным посевом на гонококки.

А мазок «на трихомонады» сочетается с мазком «на гонорею».

Для культурального метода исследования необходимы значительные сроки изготовления.

Так как возбудитель должен адаптироваться ко внешней среде и продемонстрировать рост колоний.

Спустя 2-4 суток роста посев извлекается и рассматривается под микроскопом.

На следующий день обычно пациенты получают расшифровку анализа.

Посев на трихомониаз: частые вопросы пациентов

Посев на трихомонаду для мужчин и женщин выполняется по-разному?

Разница для пациентов разного пола заключается только в местах забора материала на исследование. Для женщин это канал шейки матки, влагалище и мочеиспускательный канал. Для мужчин – уретра, предстательная железа, эякулят, причем забор семенной и простатической жидкости делает врач

Когда назначают посев на наличие трихомонад?

Когда сдавать посев после заражения?

Посев будет информативен уже в инкубационный периоде. Но максимально благоприятен для диагностики манифест заболевания. Посев необходим для точного определения возбудителя, при непонятной клинической картине. торпидных формах течения болезни. Еще необходим контрольный посев, его выполняют через 2-3 недели по окончании лечения, чтобы убедиться в отсутствии возбудителя.

Когда можно брать после антибиотиков посев на трихомонады?

Если антибиотикотерапия назначалась по поводу другого заболевания, то она будет искажать первичную диагностику. Возможен ложно отрицательный результат посева, то есть колонии на питательной среде не станут прорастать. Следует подождать 1-2 недели по окончании курса антибиотиков, прежде чем сдавать анализ. Тот же принцип используется и при выполнении контрольного посева по окончании лечения. Но если имеется яркая клиника половой инфекции, посев может быть информативен и раньше, чем через пару недель после приема препаратов.

Каким врачом назначается посев на трихомонаду или гонорею?

Назначить такой анализ может любой врач, но если он не умеет забирать материал, то на посев направляют только мочу. Обычно эти назначения делает врач-венеролог или гинеколог.

Мазок у мужчины или женщины показал трихомониаз: что делать?

При наличии явной клинической картины анализ просто подтвердил диагноз. Если симптоматики нет, то нельзя исключить и ложноположительный результат. Но определить заболевание только по одному исследованию рискованно. Поэтому врач назначает ряд исследований. и по совокупности делает заключение о диагнозе. Показатели микроскопии желательно подтвердить при помощи ИФА или ПЦР.

Микроскопия нативных (живых) препаратов при трихомониазе

Материалом данного исследования являются эякулят, влагалищные смывы, осажденная моча.

Лаборант изучает внешний вид, количество, активность простейших.

Материал нужно срочно, за 2 часа, доставить в лабораторию, иначе трихомонады погибнут и не будут обнаружены.

Мазки на трихомониаз

Мазок, в отличие от нативного препарата, окрашивается метиленовым синим или по специальным авторским методикам (Грам, Романовский-Гимзе).

Поэтому долго сохраняется пригодным для изучения.

Дополнительно в мазках можно выявить прочие признаки воспаления, провести генетический анализ.

Диагностика урогенитального трихомониаза у женщин несколько отличается от таковой у мужчин.

Мазки у женщин берутся со свода влагалища. цервикального канала

Подготовка женщины к исследованию на трихомонады

За сутки до забора материала не спринцеваться.

За 3-4 часа не мочиться.

При бессимптомном течении проводится провокация.

Для этого накануне вводится гоновакцина или пирогенал, что усиливает клинические проявления заболеваний и обеспечивает исследователя достаточным количеством материала.

Помимо лекарственных или биологических препаратов, практикуется алкогольная провокация.

Для этого накануне пациент выпивает красное вино или пиво.

Что берется для лабораторных исследований

  • отделяемое канала шейки матки;
  • смыв или аспират из влагалища;
  • осажденная моча после центрифугирования.

Подготовка мужчин к исследованию на трихомонады

За 3-4 часа не мочиться.

При бессимптомном течении – провокация.

Что берется для лабораторных исследований

  • отделяемое уретры (зондом или ложкой Фолькмана на 5-7 см в мочеиспускательный канал);
  • секрет предстательной железы (после массажа простаты);
  • эякулят;
  • центрифугат свежевыведенной мочи.

Расшифровка результатов выполняется врачом-клиническим лаборантом.

Обнаруживают грушевидные или овальные простейшие с жгутиками.

Интерпретация микроскопии бывает ошибочной.

Ложноположительный результат: при микроскопии за простейших принимают клетки эпителия.

Ложноотрицательный результат: при микроскопии в забор попало много посторонних клеток.

Или возбудителей мало и их не оказалось именно во взятом материала (низкий титр возбудителя).

Возможно, инкубационный период был слишком короток, паразиты не успели вырасти до видимых размеров.

При неудачах лечения посев повторяют еще раз спустя 2-3 недели.

Тем не менее, культуральный и микроскопический методы распространены и активно применяются в диагностике трихомониаза и гонореи.

Мазок на трихомониаз: вопросы пациентов

В расшифровке мазка указано: трихомониаз, разрушенные клетки эпителия. Что это значит?

Это значит, что при микроскопии увидели простейших, вызывающий урогенитальный трихомониаз, к тому же интенсивно идет процесс воспаления.

Откуда берут мазки на трихомониаз у женщин?

Мазки берет врач на кресле из канала шейки матки, уретры и стенки влагалища. Трихомонады также находят в моче, при этом можно как посмотреть под микроскопом на живые клетки, так и окрасить мочу на мазке. У женщин шприцом забирают аспират содержимого полости матки как анализ на трихомониаз.

Как сдавать анализ мочи на трихомонаду?

Для анализа требуется свежая порция утренней мочи, так как перед сбором не нужно мочиться в течение 3-4 часов, а также спринцеваться и подмываться. Моча проходит центрифугирование и осаждается, то есть отстаивается после центрифуги. Этот материал попадает под микроскоп, предварительно окрашиваясь. Для мужчин используется также центрифугирование эякулята, окрашенного по Маю-Грюнвальду-Гимзе, что информативнее осмотра нативного препарата.

Отличаются ли методы окраски у мужчин и женщин?

Отличия зависят от материала, поэтому эякулят и секрет простаты окрашивают по Маю-Грюнвальду-Гимзе или по Романовскому-Гимзе, аспират влагалища – по Граму. Практически все материалы можно покрасить метиленовым синим, хотя точность будет ниже. Моча окрашивается одинаково для обоих полов.

Альтернативные методы диагностики трихомониаза

Для постановки не обязательно увидеть непосредственно возбудитель.

Можно попытаться обнаружить его ДНК илиотследить реакцию организма пациента именно на данный вид инфекционного или паразитарного агента

ПЦР – полимеразная цепная реакция – генодиагностический метод.

Направлен на обнаружение ДНК или нуклеиновых кислот возбудителя.

Метод не дешев, но точен, особенно при торпидной форме заболевания.

ПЦР определяет мишени генома вирусов. бактерий и одноклеточных организмов, что весьма востребовано в венерологии.

Чувствительность ПЦР — 97%. тогда как посев – 80%. а микроскопия мазка – всего 36%.

Культуральный метод, считающийся «золотым стандартом», способен пропустить около 10 из 100 случаев трихомониаза, затем подтвержденных ПЦР.

По данным японских специалистов, ПЦР одинаково часто с микроскопией обнаруживает хламидии, но в два раза чаще – гонококки и трихомонады.

Генетические тесты назначают при сомнительны посевах, смешанных инфекциях, для контроля излеченности.

Иммунологическая диагностика — иммунологический анализ крови, влагалищного содержимого. эякулята на антитела к трихомонаде.

Иммунологическому анализу подвергается также содержимое уретры или влагалища.

Иммуноблот позволяет варьировать антигенные маркеры: прямая и непрямая агглютинация, флюоресценция антител, метод комплемента и собственно иммуноферментный анализ.

От чего зависит иммунный ответ:

  • характер патогена/ антигена (особенности самой трихомонады);
  • концентрация патогенов/антигенов в материале;
  • показатели стимуляции иммунной системы: перенесенные ранее болезни, длительность настоящего случая.

Иногда получается ложноотрицательная реакция, так как возбудитель слаб или система иммунитета к нему не чувствительна.

При иммуносупрессии реакция скорее всего будет ложноотрицательной.

Ложноположительная реакция бывает, если пациент ранее перенес трихомониаз, так как антитела долго остаются в сыворотке крови.

Есть анализ, направленный на поиск в мазках вагинального соскоба специфических белков трихомонад в биологических пробах с использованием антител моноклональных.

Метод быстрый (в течение часа), но практически столь же точный, что и культуральный (посев).

Особенно удобно применять ИФА мазков для контроля лечения.

ПИФ (прямая иммунофлюоресценция), ИФА (иммуно-ферментный анализ) не очень точны именно при диагностике трихомониаза.

На ранних этапах заболевания иммунологический анализ на антитела к трихомонаде бессмысленен.

Так как иммунитет не успевает отреагировать на вторжение простейших.

Его выполняют только когда иммуноглобулины появляются в крови, то есть после окончания продромального периода инфекции (1-3 недели).

При качественном анализе в венозной крови обнаруживаются иммуноглобулины класса G к трихомонаде.

При количественном анализе изучается титр антител (их количество в мл); при трихомонадной инфекции титр снижается медленно.

Сроки появления антител после инфицирования и сроки их исчезновения после излечения ограничивают информативность иммунологических тестов.

Для контроля излечения они не употребляются, так как сохраняются в крови около года.

ПЦР на трихомониаз: вопросы пациентов

Можно ли проводить ПЦР во время менструации?

Нет, ни во время менструации, ни в течение еще 5 дней материал на ПЦР не забирают. При гонорее месячные могут служить естественной провокацией, поэтому для микроскопии по окончании кровянистых выделений маки берутся. Но для ПЦР они тоже не пригодны в течение 5 дней.

Как убрать из крови антитела к трихомонадам?

Никак. Постепенно они сами уйдут в течение года.

Взаимоисключающие результаты: антитела к трихомонадам отрицательные, а ПЦР положительный или наоборот?

Увы, 100% точной диагностики не существует. Но ПЦР редко дает ложноотрицательные результаты и совсем не допускает ложноположительных. Титр может быть низок или антител нет при выраженнм снижении иммунитета. а вот ДНК или его следы перепутать невозможно. В Вашем примере нужно ориентироваться на ПЦР. Если ПЦР отрицательна, а ИФА положительна, то скорее всего. возбудителя больше нет в организме. но напряженность иммунного ответа сохраняется после недавней болезни.

Сравнение методов диагностики трихомониаза

Совершенства в реальном мире достичь невозможно.

В полной мере это утверждение относится и к лабораторной диагностике трихомониаза.

При яркой и убедительной клинической картине для предварительного диагноза достаточно микроскопии живого препарата или мазка.

Но в дальнейшем спектр исследований расширяется.

Стертая или торпидная форма болезни потребует большей точности.

«Золотым стандартом» диагностики считают посев, то есть культуральный метод.

Он убедителен, не дает ложноположительных результатов, но занимает время около недели.

Иммунологический метод быстрее, но не может применяться в инкубационный период или для контроля лечения.

В первом случае антител еще не будет.

А во втором титр не успеет снизиться, и отличить болезненный процесс от последствий не получится.

При выборе метода врач-венеролог (а какой еще врач направляет на диагностику инфекций, передающихся половым путем?) ориентируется на особенности организма пациента.

Как выявляется трихомонада у мужчин:

  • диагностика трихомониаза сложнее, невозможно использовать только один анализ на трихомонаду;
  • возбудители в уретре менее подвижны;
  • площадь расположения патогенного агента меньше, есть риск ложноотрицательного результата;
  • забор материала субъективно неприятнее, могут быть случаи отказа от исследований;
  • проводится комбинация как материалов, так и методов диагностики.

Клиническая картина у мужчин также менее выраженная, зато склонность к носительству ничуть не меньше.

Подтверждением служит молекулярно-биологический метод, ПЦР, посев.

Для женщин сдать анализ на трихомонады субъективно проще.

Материала скорее всего будет достаточно для постановки диагноза при ПЦР, посеве, да и микроскопия позволит установить истину в первом приближении.

Отложить диагностику может заставить менструация, но и она способна сыграть роль естественной провокации при стертой форме заболевания.

Влияют на выбор метода диагностики и сопутствующие заболевания.

Гонорея имеет похожую симптоматику. но у женщин обычно проявляется скудными симптомами.

Микроскопия позволит увидеть и простейших, и гонококки в одном мазке.

Посев также обеспечит рост всех имеющихся возбудителей.

А вот альтернативные методы специфичны и не могут «заодно» выявить что-то другое.

При бартолините – воспалении желез в преддверии влагалище – поражаются бартолиновы железы.

Именно они обеспечивают естественную смазку и увлажнение влагалища.

При трихомонадной инфекции, гонорее, молочнице выводные каналы желез закрываются выделениями, начинается воспаление.

Поэтому при появлении уплотнений, болезненности, местном повышении температуры проводят посев на трихомоноз и иные возбудители ЗППП.

Лабораторная диагностика выполняется на всех этапах лечения: первично, в динамике, для контроля.

Через 14 дней по окончании курса лечения проводят:

  • микроскопию;
  • NASBA (генетический метод поиска специфичных РНК);
  • культуральный метод (посев «на флору»).

Через 30 дней по окончании курса лечения проводят ПЦР.

Таким образом, невозможно ответить: какой анализ на трихомонаду лучше.

Все зависит от условий проведения диагностического тестирования, особенностей как колонии возбудителей.

Также и от самого пациента, стадии заболевания и даже материальных возможностей клиники.

Где лучше всего сдавать анализы на трихомониаз

  • Там, где забор материала выполняется специалистом по венерическим болезням постоянно, «на потоке».
  • Там, где обеспечивается контроль стерильности инструментария.
  • Там, где присутствует самая современная диагностика. Например, в последние годы появились экспресс-методы ПЦР или усиленной микроскопии.
  • Там, где специалисты будут проводить своевременное и лабораторно контролируемое лечение
  • Там, где Вам предоставят наиболее полную и понятную информацию, где пациента уважают как равного участника борьбы с заболеванием.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *