Интерферон препараты

Об интерферонах

Цитокины. В семейство цитокинов входят интерлейкины, интерфероны, хемокины, ростовые и колониестимулирующие факторы, представляющие собой сигнальные полипептидные молекулы иммунной системы. Обладая широким спектром биологической активности, они определяют не только адекватный уровень иммунного ответа, но и регулируют взаимодействия главных интегративных систем организма — нервной, иммунной и эндокринной.

Структура и механизм действия большинства цитокинов охарактеризованы достаточно полно. Благодаря использованию методов генной инженерии и современной биотехнологии многие цитокины в настоящее время производятся в виде рекомбинантных препаратов, идентичных эндогенным молекулам, в количестве достаточном для их клинического применения.

Многие микроорганизмы – бактерии, дрожжи, вирусы – используются в качестве реципиентов чужеродного генетического материала с целью получения рекомбинантных штаммов – продуцентов биотехнологической продукции. Так получены рекомбинантные штаммы Е. coli, продуцирующие интерфероны, инсулин, гормоны роста, разнообразные антигены; штаммы В.subtilis, вырабатывающие интерферон; дрожжи, продуцирующие интерлейкины и др.

Использование рекомбинантных цитокинов, обеспечивающих адекватную и целенаправленную медикаментозную коррекцию иммунных дисфункций, повышает эффективность иммунотерапии и лечения в целом. Вводимые в организм цитокины восполняют дефицит эндогенных регуляторных молекул и полностью воспроизводят их эффекты. Это особенно важно в условиях тяжелой или хронической патологии, когда применение традиционных иммуномодуляторов или индукторов синтеза цитокинов бесполезно из-за истощения компенсаторных возможностей иммунной системы. В настоящее время терапия рекомбинантными цитокинами является одним из наиболее перспективных и постоянно расширяющихся направлений иммунофармакологии.

Особое место в свете современных представлений о молекулярных механизмах иммунных реакций принадлежит интерферону гамма (далее – интерферон-y, IFN-y) – регуляторному цитокину иммунного ответа.

На основе рекомбинантного IFN-y создан препарат РЕКОФЕРОН® ГАММА. Рекомбинантный IFN-y в организме животных и человека при терапии и профилактике заболеваний различной этиологии обеспечивает адекватную и целенаправленную медикаментозную коррекцию иммунных дисфункций, восполняя дефицит эндогенных регуляторных молекул и полностью воспроизводя их эффекты. Высокая иммунокорригирующая эффективность, прогнозируемость и селективность его действия обусловлены наличием на клетках специфических рецепторов, и существованием природных механизмов его элиминации. Лекарственные препараты на основе рекомбинантного IFN-y являются мощными средствами патогенетической иммуно-ориентированной терапии и обладают как прямым замещающим действием, так и оказывают различные индуктивные эффекты. В настоящее время они находят широкое применение в лечении инфекционных, онкологических и некоторых других заболеваний животных.

КЛАССИФИКАЦИЯ И РОЛЬ ИНТЕРФЕРОНОВ

У млекопитающих, птиц, рептилий и рыб обнаружены противовирусные вещества широкого спектра действия – интерфероны. Впервые они были обнаружены при изучении вирусной интерференции, когда животное, зараженное одним вирусом, устойчиво к заражению другим неродственным вирусом.

Интерфероны (IFN, ИФН) — общее название, под которым в настоящее время объединяют ряд биологически активных белков или гликопротеидов со сходными свойствами, синтезируемых клетками организма в процессе защитной реакции в ответ на вторжение чужеродных агентов: вирусную инфекцию или антигенное воздействие. Благодаря интерферонам клетки становятся невосприимчивыми по отношению к вирусу. Определяемый в качестве интерферона фактор должен быть белковой природы, обладать антивирусной активностью по отношению к разным вирусам, опосредованной клеточными метаболическими процессами, включающими синтез РНК и белка.

Интерфероны — мультигенное семейство индуцибельных цитокинов, обладающих разнообразными функциями, включающими противовирусную, антипролиферативную, противоопухолевую и иммуномодулирующую.

В настоящее время известно более 20 интерферонов, различающихся по структуре, биологическим свойствам и преобладающему механизму действия. IFN подразделяют на три типа:

  • Тип I — известный как вирусный интерферон, включает IFN-a (лейкоцитарный, синтезируется активированными моноцитами и В-лимфоцитами), IFN-b (фибробластный, синтезируется фибробластами и эпителиальными клетками, макрофагами), IFN-w, IFN-k;
  • Тип II — известный как иммунный, включает IFN-y (синтезируется активированными Т-лимфоцитами и NK-клетками);
  • Тип III — был обнаружен позже типа I и типа II, информация о нем свидетельствует о важности IFN типа III в некоторых видах вирусных инфекций.

Первому типу (IFN-a, IFN-b), главным образом, присущи антивирусный и антипролиферативный эффекты, в меньшей степени — иммуномодулирующий. Они вырабатываются непосредственно после встречи с патогеном, их действие направлено на локализацию возбудителя и предотвращение его распространения в организме. Главное действие IFN-b локальное, направленное на предотвращение распространения возбудителя инфекции из места его внедрения. Если не происходит инактивация инфекционного агента в месте внедрения, и он циркулирует в организме, его контакт с лимфоцитами и макрофагами индуцирует выработку IFN-a. Последний быстро распространяется током крови и проникает в окружающие ткани, поскольку его главной функцией является защита отдаленных органов. Эти интерфероны осуществляют раннюю и неспецифическую защиту организма от инфекционного агента.

Главное действие интерферонов второго типа (IFN-y) — участие в реакциях иммунитета. Он начинает вырабатываться на последующих этапах инфекционного процесса уже сенсибилизированными Т-лимфоцитами и активно участвует в каскаде специфического иммунного ответа.

Вирусные интерфероны индуцируются в процессе вирусной инфекции, а синтез интерферонов II типа (IFN-y) индуцируется митогенными или антигенными стимулами. Большинство типов вирусоинфицированных клеток способно синтезировать IFN-a/b в клеточной культуре. В противоположность этому IFN-y синтезируется только некоторыми клетками иммунной системы, включая естественные киллерные (NK) клетки, CD4 Т-клетки и CDS цитотоксические супрессорные клетки.

Виды и свойства интерферонов представлены в таблице 1.

Таблица 1. Характеристика различных видов интерферонов

Характеристика IFN-a IFN-b IFN-y
Химическое строение Протеин Гликопротеин Гликопротеин
Молекулярный вес, кДа 17,5-23,0 23,0 20,0-23,0
Число кодирующих генов более 20 1 1
Количество подтипов по крайней мере,
22 у человека,
еще несколько определены у животных
1 1
Функциональная форма мономер димер димер
Кислотоустойчивость Есть Есть Нет
Индукторы Вирусы
(РНК > ДНК),
В-митогены
Вирусы
(РНК > ДНК),
В-митогены
Антигены,
Т-митогены
Основные источники Моноциты,
В-лимфоциты
Эпителиоциты, моноциты Т-лимфоциты,
NK-клетки
Механизм действия Угнетает синтез белка Угнетает синтез белка Усиливает антигены МНС; активизирует цитотоксические Т-клетки, макрофаги и NK-клетки

МЕХАНИЗМ ДЕЙСТВИЯ ИНТЕРФЕРОНОВ

ПРОТИВОВИРУСНОЕ ДЕЙСТВИЕ

Интерфероны не действуют непосредственно на вирус. Под их влиянием клетка становится резистентной к инфекции. Интерфероны являются первой линией защиты от вирусной инфекции, поскольку начинают вырабатываться сразу же после контакта с вирусом. При этом выраженность ответа прямо пропорциональна заражающей дозе.

В покое нормальные клетки содержат незначительное количество IFN, поскольку гены, кодирующие их, не транкрибируются. Транскрипция начинается после контакта клетки с соответствующим индуктором. Индукторами IFN-a и -b являются вирусы, РНК (особенно двунитевая), липополисахариды (LPS), компоненты некоторых бактерий. Среди вирусов наиболее сильными индукторами интерферонов являются РНК-геномные. ДНК-содержащие вирусы — слабые индукторы (за исключением поксвирусов). Индукторами IFN-y выступают антигены и Т-митогены.

Блокада транскрипции генов, кодирующих IFN, осуществляется за счет выработки клеткой белка-супрессора, связывающего на цепи нуклеиновых кислот область, контролирующую транскрипцию данных генов. Кроме того, для запуска транскрипции необходим белок-активатор, разблокирующий и активирующий эту зону. Индукторы IFN могут влиять как на угнетение вы-работки белка-супрессора, так и на активацию синтеза белка-активатора. Активация генов приводит в действие синтезирующую белок систему клетки, в результате чего осуществляется синтез и секреция IFN.

В результате связывания молекул IFN со специфическими интерфероновыми рецепторами на поверхности клеток происходит активация группы генов (локализованных у человека в 21-й хромосоме). Этот процесс сопровождается формированием более 20 новых внутриклеточных белков, способствующих возникновению резистентности к вирусам. Основными из них являются два — 2′,5′,-олигоаденилатсинтетаза и протеинкиназа. 2′,5′,-олигоаденилатсинтетаза представляет собой фермент, конвертирующий аденозинтрифосфат (АТФ) в 2′,5′,-олигоаденилат. Последний активирует РНК-азу L, которая приводит к повреждению как клеточной, так и вирусной РНК. За счет инактивации фактора elF-2 (пролонгирующего фактора) протеинкиназа инактивирует удлинение пептидных цепей вирусных белков.

Таким образом, под воздействием IFN в клетке синтезируется два фермента, один из которых расщепляет вирусную РНК, а другой тормозит синтез вирусных белков. В результате новые вирусные частицы либо вовсе не формируются, либо их число уменьшается в десятки или сотни раз.

Под влиянием IFN повреждается и синтезирующая белок система клетки, что может привести к ее гибели. Однако это касается только клеток, инфицированных вирусом. Неинфицированные клетки индифферентны к воздействию IFN, поскольку оба вышеуказанных белка активируются лишь в присутствии вирусной РНК. Некоторые вирусы способны блокировать противовирусное действие IFN. Так, например, аденовирусы продуцируют специфическую РНК, которая предотвращает активацию протеинкиназы.

Противовирусный эффект интерферонов обобщен и представлен на схеме 1.

Схема 1. Противовирусный эффект интерферонов

Как видно из схемы, связывание IFN с рецептором индуцирует в клетке три одновременно протекающих процесса, которые заканчиваются:

  • активацией латентной эндорибонуклеазы, приводящей к разрушению вирусной РНК;
  • подавлением синтеза вирусной матричной РНК;
  • подавлением синтеза белков вирусной оболочки.

Эти механизмы интегрально реализуют противовирусный эффект, приводя к подавлению репликации вируса.

ИММУНОМОДУЛИРУЮЩЕЕ ДЕЙСТВИЕ

IFN обладают не только противовирусным, но и иммуномодулирующим действием за счет влияния на экспрессию рецепторов главного комплекса гистосовместимости (МНС). IFN увеличивают экспрессию молекул 1-го класса МНС на всех видах клеток, тем самым улучшая распознавание инфицированных клеток цитотоксическими Т-лимфоцитами (CTL). Кроме того, IFN-y усиливает экспрессию молекул 2-го класса МНС на антигенпрезентирующих клетках, в результате чего улучшается презентация вирусных антигенов CD4+ лимфоцитам и активируются натуральные киллеры (NK-клетки). IFN также стимулируют фагоцитоз.

Регуляция иммунного ответа цитокинами (рис. 1), в том числе интерферонами, происходит по эстафетному принципу, воздействие цитокина на клетку вызывает образование ею других цитокинов – цитокиновый каскад.

Рис. 1. Цитокиновая регуляция иммунного ответа (по Воробьеву А.А. и др., 2003)

АНТИПРОЛИФЕРАТИВНОЕ И ПРОТИВООПУХОЛЕВОЕ ДЕЙСТВИЕ

Антипролиферативный и противоопухолевый эффекты IFN объясняются следующими механизмами:

  • активацией цитотоксических клеток;
  • усилением экспрессии опухольассоциированных антигенов;
  • модуляцией продукции антител;
  • ингибицией действия опухолевых ростовых факторов;
  • ингибицией синтеза РНК и белков опухолевой клетки;
  • замедлением клеточного цикла с переходом в фазу «покоя»;
  • стимуляцией опухолевых клеток к созреванию;
  • восстановлением сдерживающего контроля за пролиферацией;
  • торможением образования новых сосудов в опухоли;
  • ингибицией метастазирования;
  • биомодуляцией активности цитостатиков: изменением метаболизма и снижением клиренса;
  • преодолением лекарственной резистентности за счет ингибиции генов множественной лекарственной резистентности.

АНТИБАКТЕРИАЛЬНОЕ ДЕЙСТВИЕ

В последние годы показано, что IFN обладают также антибактериальным эффектом, в основе которого лежит способность IFN индуцировать активность некоторых ферментов в пораженной клетке:

1. Индукция индоламин-2,3-дезоксигеназы приводит к снижению внутриклеточного содержания L-триптофана, что, в свою очередь, является при-чиной гибели бактериальной клетки в связи с нарушением метаболизма;

2. Индукция NO-синтетазы приводит к продукции NO – мощного бактерицидного фактора, способствующего разрушению бактериальной клетки.

Кроме того, антибактериальная роль IFN-y заключается в активации макрофагов, которые продуцируют провоспалительные цитокины, а также активные формы кислорода и азота, простагландины. Эти факторы способствуют развитию воспалительного процесса, ведущего к гибели бактерий.

ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКАЯ РОЛЬ ЭНДОГЕННОГО ИНТЕРФЕРОНА ГАММА

Рис. 2. Структура молекулы интерферона гамма

Основные продуценты эндогенного IFN-y — естественные киллерные (NK) клетки и Т-лимфоциты. Среди Т-лимфоцитов продуцентами IFN-y являются как цитотоксические CD8+-, так и хелперные CD4+ Т-лимфоциты, однако при дифференцировке на Тх1 и Тх2 способность продуцировать IFN-? имеют только Тх1.

Индуцировать выработку IFN-y способны интерфероногенные вещества, антигены, Т-митогены и некоторые цитокины. Продукция IFN-y находится под контролем цитокинов. IL-12 и IL-18 усиливают его экспрессию, а IL-2 способствует реализации функции CD4+ лимфоцитов, активируя выработку IFN-y.

Синтез IFN-y подавляется IL-4, IL-10, дексаметазоном, циклоспорином А, вирусными белками-супрессорами, раковыми клетками.

Фоновое количество IFN-y всегда есть в организме, даже если нет ин-фекции, например, анализ на интерфероновый статус показывает у здоровых людей и животных всегда определяемое количество IFN в крови, оно при стимуляции или инфекции многократно возрастает. Однако при герпе-свирусной инфекции и на последних стадиях опухолевого процесса, количество IFN-y стремиться к нулю, так как вирус герпеса и раковые клетки продуцируют белки, блокирующие синтез IFN-y. Поэтому при герпесвирус-ной инфекции и раке индукторы интерферонов бессмысленны, их нужно вводить в организм извне.

IFN-y обладает сходным с другими IFN биологическим действием (подавление репликации вирусов, антипролиферативное действие, иммуномодулирующий эффект), но IFN-y теснее связан с системой цитокинов и вносит более существенный вклад в иммунорегуляцию.

Биологическая активность IFN-y реализуется через специфические клеточные рецепторы и внутриклеточный сигнальный протеинкиназный каскад, приводящий к активации соответствующих транскрипционных факторов и транскрипции целого семейства генов, кодирующих факторы резистентности к инфекционным агентам и комплементарные цитокины.

Клетками — мишенями для действия IFN-y являются макрофаги, нейтрофилы, естественные киллерные клетки, цитотоксические Т-лимфоциты, имеющие на своей поверхности рецепторы к IFN-y (рис. 3).

Рис. 3. Эффекты интерферона гамма (по А. Ройту и др., 2000 г.)

Т-лимфоциты и макрофаги. Важнейшей функцией IFN-y является его участие в опосредовании взаимосвязей между лимфоцитами и макрофагами и в регуляции соотношения клеточной и гуморальной составляющих адаптивного иммунного ответа (рис. 1). IFN-y служит стимулятором макрофагов, способствуя проявлению различных функций этих клеток, включая процессинг и презентацию антигенов, выработку цитокинов, генерацию активных форм кислорода и азота. К цитокинам, продукция которых усиливается под влиянием IFN-y, относятся ИЛ-1 и ИЛ-12 (этот цитокин усиливает синтез IFN-y и диффренцировку Т-хелперов в сторону Тх1).

IFN-y повышает экспрессию антигенов МНС I класса, которые играют важную роль в распознавании чужеродных клеток (вирусинфицированные, опухолевые) CD8+ цитотоксическими Т-лимфоцитами и повышает экспрессию антигенов МНС II класса на антигенпредставляющих клетках.

IFN-y снижает секреторную активность Th2, подавляя синтез IgE, IgG(2,4) и IgA. Одновременно IFN-y усиливает развитие Th1-зависимого адаптивного иммунного ответа. IFN-y вместе со своим антагонистом IL-4 поддерживает баланс Th1/Th2.

Цитотоксические Т-лимфоциты и NK-клетки с помощью IFN-y участвуют в реализации цитотоксического эффекта (противоопухолевая и противовирусная активность). При введении в организм IFN-y активность NK-клеток повышается уже через несколько часов.

Моноциты. IFN-y стимулируют экспрессию высокоаффинного рецептора IL-2 (IL-2R) на мембране моноцитов, повышая их восприимчивость к IL-2. В свою очередь IL-2 при воздействии на моноциты стимулирует их способность уничтожать опухолевые клетки и бактерии. В результате стимуляции IFN-y и IL-2 моноциты вырабатывают большое количество биологически активных веществ и медиаторов воспаления: свободные формы кислорода, H2O2, простагландин Е2, тромбоксан В2, TNF-a (фактор некроза опухоли a).

Нейтрофилы. IFN-y повышает активность цитохрома b558 в нейтрофилах (например, при недостаточности фагоцитов — при хронической гранулематозной болезни), что сопровождается активизацией внутриклеточного разрушения бактерий и снижает риск инфекций.

IFN-y активирует продукцию белков острой фазы воспаления, усиливает экспрессию генов С2 и С4 компонентов системы комплемента.

В-лимфоциты. IFN-y ингибирует В-клеточный ответ на IL-4, подавляет продукцию IgE и экспрессию CD23-антигена. Так, при синдроме гиперпродукции IgE и диффузном нейродермите у человека применяется IFN-y, он угнетает синтез IL-4 и IL-5 T-хелперами. IFN-y является индуктором апоптоза дифференцированных В-клеток, дающих начало аутореактивным клонам. Отменяет супрессивный эффект IL-4 на IL-2-зависимую пролиферацию и генерацию лимфокин-активированных киллеров.

Таким образом, играя важную роль в иммунорегуляции, IFN-y является ключевым цитокином клеточного и ингибитором гуморального адаптивного иммунного ответа.

IFN-y имеет решающее значение для врожденного и адаптивного иммунитета против вирусных, бактериальных и некоторых протозойных инфекций.

Противовирусное действие IFN-y заключается в том, что он блокирует репликацию вирусных ДНК и РНК, синтез вирусных белков и сборку зрелых вирусных частиц (схема 1).

IFN-y влияет на клеточный иммунный ответ, активируя Th1-клетки, NK-клетки, макрофаги, цитотоксические Т-лимфоциты. Он повышает как неспецифическую резистентность, так и антиген-специфический иммунный ответ. При этом IFN-y вызывает цитотоксическое действие на вирус-инфицированные клетки (рис. 3, 4).

Антибактериальное действие IFN-y заключается в его способности индуцировать активность некоторых ферментов в пораженной клетке, что приводит к нарушению метаболизма и разрушению бактериальной клетки. Кроме того, активированные IFN-y цитотоксические Т-лимфоциты и NK-клети реализуют цитотоксический эффект, а активированные макрофаги продуцируют провоспалительные цитокины, активные формы кислорода и азота, простагландины. Эти факторы способствуют развитию воспалительного процесса, ведущего к гибели бактерий.

Антипролиферативный эффект IFN-y заключается в подавлении роста опухолевых клеток за счет подавления синтеза РНК и протеинов, ингибирования опухолевых ростовых факторов, стимулирующих пролиферацию клеток, замедлении клеточного цикла с переходом в фазу «покоя», восстановлении сдерживающего контроля за пролиферацией, а также за счет активации цитотоксических Т-лимфоцитов и NK-клеток, которые участвуют в реализации цитотоксического эффекта.

Рис. 4. Противовирусный иммунный ответ (по Воробьеву А.А. и др., 2003)

Таким образом, все интерфероны представляют собой группу полифункциональных белковых факторов с выраженным противовирусным и противоопухолевым эффектом разной степени. IFN-a обладает самой сильной противовирусной активностью среди всех интерферонов, а IFN-y имеет более выраженную антипролиферативную активность. Все интерфероны обладают иммунорегуляторным действием разной степени выраженности (мак-симальной обладает IFN-y) – повышает активность макрофагов, Т-лимфоцитов и NK-клеток.

ПРОИЗВОДСТВО РЕКОМБИНАНТНЫХ ИНТЕРФЕРОНОВ

Интерфероны получают двумя способами: лейкоцитарные — получают из донорской крови человека и животных после воздействия на нее вирусами; рекомбинантные — получают методом генетической рекомбинации – молекулярной биотехнологии. Лейкоцитарные интерферон обязательно проверяется на наличие антител к вирусам для исключения возможного заражения при их применении. Рекомбинантные интерфероны абсолютно безопасны, при их применении полностью исключена вероятность заражения пациента.

Генетическая инженерия является сердцевиной биотехнологии. Она по существу сводится к генетической рекомбинации, т.е. обмену генами между двумя хромосомами. Метод рекомбинации in vitro или генетической инженерии заключается в выделении или синтезе ДНК из отличающихся друг от друга организмов или клеток, получении гибридных молекул ДНК, введении рекомбинантных (гибридных) молекул в живые клетки, создании условий для экспрессии и секреции продуктов, кодируемых генами.

Гены, кодирующие те или иные структуры, или выделяют (клонируют) как таковые (хромосомы, плазмиды), или прицельно выщепляют из этих генетических образований с помощью ферментов рестрикции. Эти ферменты, а их уже известно более тысячи, способны резать ДНК по многим определенным связям, что является важным инструментом генной инженерии. В последнее время обнаружены ферменты, расщепляющие по определенным связям РНК, наподобие рестриктаз ДНК. Эти ферменты названы рибозимами.

Сравнительно небольшие гены могут быть получены с помощью химического синтеза. Для этого вначале расшифровывают число и последовательность аминокислот в белковой молекуле вещества, а затем по этим данным узнают очередность нуклеотидов в гене, поскольку каждой аминокислоте соответствуют три нуклеотида (кодон). С помощью синтезатора создают химическим путем ген, аналогичный природному гену.

Полученный одним из способов целевой ген с помощью ферментов лигаз сшивают с другим геном, который используется в качестве вектора, для встраивания гибридного гена в клетку. Вектором могут служить плазмиды, бактериофаги, вирусы человека, животных и растений.

Экспрессируемый ген (например, ген IFN-y) в виде рекомбинатной ДНК встраивается в бактериальную клетку Е. coli, которая приобретает новое свойство — продуцировать несвойственное этой клетке вещество (IFN-y), кодируемое экспрессируемым геном (рис. 5).

Рис. 5. Биотехнологический метод получения рекомбинантного IFN-y
(РЕКОФЕРОНА® ГАММА)

В качестве реципиентов экспрессируемого гена чаще всего используют Е. coli, В. subtilis, псевдомонады, нетифоидные серовары сальмонелл, дрожжи, вирусы.

Методом генной инженерии созданы сотни препаратов медицинского и ветеринарного назначения, получены рекомбинантные штаммы-суперпродуценты, многие из которых нашли практическое применение. Уже используются в медицине полученные методом генной инженерии вакцины против гепатита В, интерлейкины-1, 2, 3, 6, инсулин, гормоны роста, интерфероны a, b, у, фактор некроза опухолей, пептиды тимуса, миелолептиды, тканевый активатор плазминогена, эритропоэтин, антигены ВИЧ, фактор свертывания крови, моноклональные антитела и многие антигены для диагностических целей.

Одними из ключевых компонентов иммунного ответа являются Интерлейкин-2 (IL-2), Интерферон гамма (IFN-y) и Интерферон альфа (IFN-a). На их основе были созданы различные цитокиновые рекомбинантные препараты, которые нашли широкое применение в гуманной и ветеринарной медицине, в том числе:

ПРЕПАРАТЫ ИНТЕРФЕРОНОВ

Препараты интерферонов составляют отдельную группу противовирусных средств. Они были созданы на основе расшифровки биохимического строения природных IFN, которые вырабатываются многими клетками крови.
IFN представляют собой группу низкомолекулярных пептидов, обладающих противовирусной, иммуномоделирующей и антипролиферативной активностью.
На основе рекомбинантных интерферонов компанией ООО «Фарма Ген» (Санкт-Петербург) разработаны лекарственные препараты РЕКОФЕРОН® ГАММА и РЕКОФЕРОН® АЛЬФА для ветеринарного применения. Рекофероны® — это рекомбинантные интерфероны.
В настоящее время препарат РЕКОФЕРОН® ГАММА успешно прошел доклинические и клинические испытания, а также испытания в ФГБУ «ВГНКИ» при государственной регистрации, прошел процедуру государственной регистрации в Россельхознадзоре. Номер регистрационного удостоверения: 78-3-6.15-2710№ПВР-3-6.15/03158.
РЕКОФЕРОН® ГАММА – рекомбинантный интерферон гамма (IFN-y), обладает выраженной противовирусной эффективностью, относится к иммуномодуляторам.
IFN-y является регуляторным цитокином, продуцентом которого являются естественные киллерные клетки, CD4, Th1 клетки и CD8 цитотоксические супрессорные клетки. Рецепторы к интерферону гамма имеют макрофаги, нейтрофилы, естественные киллерные клетки, цитотоксические Т-лимфоциты. IFN-y активирует эффекторные функции этих клеток, в частности их микробицидностъ, цитотоксичность, продукцию цитокинов, супероксидных и нитрооксидных радикалов. IFN-y блокирует репликацию вирусных ДНК и РНК, синтез вирусных белков и сборку зрелых вирусных частиц. При этом вызывает цитотоксическое действие на вирус-инфицированные клетки.
Ингибирует В-клеточный ответ на интерлейкин-4, подавляет продукцию IgE и экспрессию CD23-антигена. Является индуктором апоптоза дифференцированных В-клеток, дающих начало аутореактивным клонам. Отменяет супрессивный эффект интерлейкина-4 на интерлейкин-2-зависимую пролиферацию и генерацию лимфокин активированных киллеров. Активирует продукцию белков острой фазы воспаления, усиливает экспрессию генов С2 и С4 компонентов системы комплемента.
Антипролиферативный эффект IFN-y заключается в подавлении роста клеток за счет подавления синтеза РНК и протеинов, а также ингибирования ростовых факторов стимулирующих пролиферацию клеток.

Интерферон альфа-2b: инструкция, формы выпуска и побочные эффекты

Интерферон альфа-2b человеческий рекомбинантный – эффективный иммуностимулятор. Действие данного вещества при гепатите С обусловлено стимуляцией естественных защитных процессов. В острой фазе HCV средство применяют для предупреждения перехода заболевания в хроническую форму.

Основные характеристики действующего вещества приведены ниже:

  • Международное непатентованное название на латинском языке (МНН) – Interferon alfa-2b human recombinant.
  • АТХ и регистрационный номер – L03АВ05.
  • Фармакотерапевтическая группа – противовирусные средства, интерфероны.

Гепатитом С показания к применению лекарства не ограничиваются. Средства, содержащие данный класс интерферона, показаны при многих заболеваниях и состояниях, включая вирусные инфекции.

Торговые названия и производители

Препараты, содержащие ИФН-α2b, выпускаются как отечественными, так и зарубежными фармацевтическими производителями.

Лекарственное вещество доступно под такими торговыми названиями:

Помимо медикаментов под торговыми названиями Reaferon, Altevir, данное вещество входит в состав и многокомпонентных аналогов. Это медикаменты предназначены для введения в прямую кишку, распыления на слизистую оболочку носовой полости или нанесения на кожу. Например, Аллергоферон, Генферон, Микоферон. Все перечисленные средства производятся в России.

Инструкция по применению

Лекарство относят к сильнодействующим, поэтому перед тем как использовать Интерферон альфа-2b, следует прочитать инструкцию по применению. Но лучше не вмешиваться самостоятельно в активность иммунной системы и при использовании средства следовать рекомендациям врача.

Лекарственная форма

Интерферон альфа-2b выпускают как для местного, так и системного использования. Чаще встречаются суппозитории, таблетки, свечи, капли глазные, капли назальные, порошок для приготовления инъекций, гели, аэрозоли.

Описание и состав

Интерферон альфа 2b – уменьшенный фрагмент белка hif-sn 206 клона лейкоцитов человека. Интерферон типа I, состоящий из 165 аминокислотных остатков с аргинином в положении 23. Многие пациенты интересуются, из чего делают вещество? Этот белок производится по технологии рекомбинантной ДНК и напоминает интерферон, секретируемый лейкоцитами. Он широко используется в качестве противовирусного или противоопухолевого средства.

Следует отдельно остановиться на таком аспекте, как отличия между Интерфероном альфа и альфа 2b. Интерферон α включает в себя все подтипы данного класса (a, b и с), в то время как α-2b является более очищенной формой вещества, содержащей только один вид протеинов и, соответственно, лучше переносится при введении внутривенно. В этом состоит основная разница.

В отдельную группу выделяют пегилированный интерферон (пегинтерферон), химическая структура которого обеспечивает пролонгированное (в течение нескольких суток) действие. В ЕС и США именно этот вид интерферонов рекомендован для применения при лечении гепатита С.

Фармакодинамика

Интерферон альфа связывается с рецепторами интерферона типа I (IFNAR1 и IFNAR2c), которые после димеризации активируют две Jak (Janus kinase) тирозинкиназы (Jak1 и Tyk2). Они сами фосфорилируют рецепторы INFAR, которые затем связываются со Stat1 и Stat2 (сигнальные преобразователи и активаторы транскрипции), которые димеризуются и активируют множество (~ 100) иммуномодулирующих и противовирусных белков.

Усиливает экспрессию белков MHC I, что позволяет увеличить презентацию пептидов, полученных из вирусных антигенов. Это усиливает активацию CD8 + T-клеток, которые являются предшественниками цитотоксических T-лимфоцитов (CTL), и делает макрофаги лучшей мишенью для CTL-опосредованного уничтожения. Интерферон альфа также индуцирует синтез нескольких ключевых противовирусных медиаторов, включая 2′-5′-олигоаденилатсинтетазу (2′-5’A-синтетазу) и протеинкиназу R.

Фармакокинетика

Всасывание

Интерферон альфа-2b хорошо всасывается после внутримышечной или подкожной инъекции. Пиковые концентрации в сыворотке после внутривенного введения обычно происходят в течение 15–60 минут.

Распределение

Интерфероны отличаются широким и быстрым распределением в тканях организма, причем самые высокие концентрации наблюдаются в селезенке, почках, печени и легких. Ограниченные данные также указывают на поглощение или связывание интерферона другими тканями или опухолями.

Метаболизм

Биотрансформация проходит физиологическим путем.

Фармакокинетические показатели в особых клинических случаях

Фармакокинетические показатели:

  • у пациентов разных возрастных групп, включая новорожденных, пропорциональны введенной дозе;
  • не исследовались у лиц с тяжелой печеночной недостаточностью.

У людей старше 69 лет задокументированные исследования о действии препарата не проводились.

Действующее вещество

Интерферон α-2b – вещество, полученное путем генной инженерии. Для производства используются искусственно культивируемые штаммы бактерий (обычно, кишечной палочки). После обработки ИФН приобретает структуру, идентичную протеину, вырабатываемому иммунокомпетентными клетками.

Показания к применению

Интерферон альфа-2b показан при:

  • острой и хронической HCV- инфекции, протекающей в средней и тяжелой форме;
  • хроническом гепатите С;
  • вирусном, бактериальном, смешанном поражении организма (при необходимости назначают с первых дней жизни, например, при острой респираторной вирусной инфекции, диарейном синдроме и т. д);
  • рассеянный склероз;
  • любые септические состояние вирусной и бактериальной природы;
  • герпес, вне зависимости от локализации, включая гениталии, офтальмологические, стоматологические и ЛОР-органы;
  • хроническое течение урогенитального хламидиоза;
  • неврологические заболевания, протекающие в тандеме с моно- и полирадикулярными болями;
  • папилломатозное поражение гортани;
  • опухолях злокачественного генеза: меланома, миелома, саркома Капоши;
  • гемобластозах: лейкемиях, лимфомах, включая Неходжкинскую.

Данный перечень включает показания как к наружному, так и к инъекционному применению лекарства.

Противопоказания

Препарат не назначают при:

  • непереносимости компонентов (по статистике, аллергические реакции на интерферон альфа-2b встречаются очень редко);
  • выраженной миелосупрессии;
  • гиперкоагуляции;
  • тяжелых видах почечной, печеночной, сердечной недостаточности;
  • декомпенсированной стадии цирроза печени;
  • тяжелой или длительной депрессии;
  • психозах различного генеза;
  • алко-, наркозависимости.

Также применение интерферонов противопоказано при аутоиммунных заболеваниях вне зависимости от их этиологии.

Способ применения и дозировка

На слизистую носа наносят 3–4 раза в сутки. Курс лечения длится примерно 5 дней, но при необходимости может быть удлинен. По идентичной схеме наносят гели или мазь на пораженные участки кожи.

Ректально применяют в различных дозировках, в зависимости от тяжести течения болезни и возраста пациента. Для облегчения использования, свечу не вынимают из холодильника до самого момента применения. После введения остаются в постели как минимум на полчаса. Лучше использовать после естественного акта дефекации.

Режим дозирования инъекционных форм подбирается индивидуально. Как правило, прописывают или 3 млн. ЕД или 5 млн. ЕД. При гепатите С средство вводят подкожно. Кратность выполнения уколов определяется врачом. При хронической форме инфекции обязательно сочетание с другими противовирусными средствами.

Применение у беременных.

Форма выпуска Способ применения у беременных
Суппозитории Назначают после 14 недель беременности и по показаниям разрешено продолжать в период грудного вскармливания
Мази Так как при наружном применении абсорбция действующего компонента незначительная, мази с интерферон альфа-2b разрешены к применению
Растворы для инъекций Внутривенно, внутримышечно запрещены

Важно не допустить зачатия в период прохождения лечебного курса, потому женщины фертильного возраста должны применять надежные контрацептивные средства.

Побочные эффекты

Способ применения Побочные эффекты
Внутримышечные или внутривенные инъекции
  • гриппоподобный синдром: лихорадящие состояния, длительные ознобы, суставные, мышечные, глазные, головные боли;
  • в пищеварении: тошнота, вплоть до рвоты, обстипация, резкое и значительное снижение аппетита, нарушение вкусовых ощущений, сухость ротовой слизистой;
  • в центральной и периферической нервной системе: головокружение, нарушение умственной деятельности, сна,
  • депрессивные состояния, эйфория, немотивированная агрессивность, беспокойство, нервозность, невропатии, парестезии, тремор (непроизвольное дрожание) конечностей;
  • в ССС: тахикардия, нестабильность артериального давления (гипер-, гипотензия), ИБС, инфаркт миокарда;
  • в дыхательной системе: кашель разной степени выраженности, одышка, боль в загрудинном пространстве, пневмонии с отеком легкого
  • в кроветворении: незначительная лейкоцитопения, гранулоцитопения, тромбоцитопения;
  • в дерматологии: кожный зуд, усиленное, но обратимое выпадение волос
Нанесение на слизистую носа Возможны местные аллергические реакции, носящие слабовыраженный местный характер. Обычно неприятная симптоматика исчезает самопроизвольно, без дополнительного лечения
Суппозитории Редко фиксировались местные реакции, жжение

Побочные действия наиболее выражены при инъекционных способах введения!

Взаимодействие

Осторожно интерферон альфа прописывают одновременно:

  • с опиатами, сильнодействующими анальгетиками, снотворными, седативными медикаментами, чтобы не спровоцировать миелосупрессию;
  • с химиотерапией при лечении онкобольных (может оказывать токсический эффект, вплоть до летального исхода);
  • с зидовудином (подобная комбинация часто осложняется нейтропенией).

Противопоказано смешивание с другими инъекционными растворами: Таурином (Taurine), Бензокаином (Benzocaine) и др.

Совместимость с алкоголем

Данных нет. Но острые и хронические заболевания печени, включая цирроз, служат поводом отказаться от спиртосодержащих напитков.

Особые указания и меры предосторожности

Вещество вызывает сонливость, быструю утомляемость, значительно снижает скорость ответных реакций, потому не следует самостоятельно водить автотранспорт или работать на сложных быстро двигающихся механизмах.

С осторожностью применяют у пациентов с:

  • почечными, печеночными патологиями;
  • серьезными нарушениями кроветворения;
  • суицидальными склонностями;
  • болезнями ССС.

Велик риск развития аритмии. Если нарушения ритма имеет место, то для начала дозу препарата уменьшают примерно на 50%. При отсутствии эффекта от медикамента отказываются.

На весь период терапевтического курса строго контролируют:

  • неврологический и психический статус;
  • основные показатели крови;
  • присутствие/отсутствие в организме очагов аутоиммунных воспалений.

С этой целью пациенту показаны регулярные лабораторные исследования.

Передозировка

Постмаркетинговое наблюдение включает в себя сообщения о пациентах, получивших передозировку, в 10 раз превышающую рекомендуемую терапевтическую дозу. После чего происходило усиление степени выраженности побочных реакций, нарушение печеночных ферментов, развитие почечной недостаточности.

Токсические эффекты после приема внутрь не ожидаются, потому что интерфероны плохо всасываются перорально.

Условия хранения

Все формы медикаментов с интерферон альфа-2b хранят при температуре от 2 до 8 гр. по Цельсию. Раствор, приготовленный для любого вида инъекций, используют незамедлительно. Раствор, предназначенный для использования интраназально, допускается хранить в течение 24 часа в холодильнике.

Срок хранения

Срок годности прописан на каждой упаковке с лекарством. По его истечении, либо при грубом и длительном нарушении температурного режима, медикамент подлежит утилизации. Как правило, препараты на основе интерферон альфа-2b хранятся от 24 до 36 месяцев, в зависимости от формы выпуска.

Прекращение терапии

По окончанию терапевтического курса для прекращения лечения не требует особых схем. К коррекции дозировки прибегают в случае возникновения тяжелых побочных действий, либо при значительном изменении в анализах периферической крови. Если после уменьшения вводимых доз состояние значительно не улучшилось, то терапию прекращают.

Цена и где купить

Интерферон альфа 2b человеческий рекомбинантный в России представлен широким ассортиментным рядом.

В Москве и Санкт-Петербурге препараты можно купить по следующим ценам:

  • ампулы: 500–1900 рублей;
  • суппозитории: до 600 рублей.

Отзывы врачей

Владислава Сергеевна, инфекционист

Предпочитаю интерферон альфа-2b многим препаратам без доказанной эффективности. Часто включаю в лекарственную схему при гепатите В и С. Отрицательные отзывы пациентов в основном касаются нежелательных эффектов: слабость, гриппоподобный синдром. Но неприятная симптоматика проходит без дополнительного лечения, а ремиссия болезни подтверждается анализами.

Отзывы пациентов, прошедших лечение

Александр, 42 года

Мне был назначен интерферон альфа-2b с рибавирином. Не могу сказать, что курс лечения прошел приятно: ознобы, головная боль, тахикардия и головокружения были для меня «нормой» с первых дней начала лечения. Но эти «побочки» вполне терпимы, главное выздороветь. Пока анализы ПЦР отрицательные.

Результаты клинических испытаний

Приведем пример испытаний интерферон альфа-2b в педиатрии, для терапии гепатита В (ВГВ) с активной репликацией вируса.

Участвовало двадцать девять детей: средний возраст 8,3 года, 18 мальчиков, 11 девочек. У пациентов была проведена биопсия, доказавшая наличие хронического вирусного гепатита В с активной репликацией вируса. Дети получили 16-недельный курс лечения интерфероном альфа-2b (9 МЕ/ м2, трижды в неделю). У четырнадцати пациентов (48%) наблюдалась постоянная потеря HBV-ДНК через 8 месяцев после окончания лечения. 11 человек (38%) потеряли антиген HBeAg. У двоих детей (7%) исчез поверхностный антиген гепатита B (HBsAg). Активность аланинаминотрансферазы нормализовалась у 12 детей.

Результаты сравнивались с естественной эволюцией заболевания в группе из 25 детей (средний возраст 8,3 года) с идентичными начальными средними значениями HBV-ДНК в сыворотке, которые наблюдались в течение того же периода. Два из них (8%) потеряли HBeAg и один (4%) HBsAg. У 23 оставшихся контрольных субъектов не было снижения сывороточной HBV-ДНК или активности трансаминаз по сравнению со значениями 1 годом ранее.

Выводы исследования. Сделан вывод, что лечение интерфероном альфа-2b у детей может привести к ингибированию репликации HBV, аналогичному описанному у взрослых, и, таким образом, может сократить развитие болезни. Необходимы дальнейшие исследования, чтобы установить лучшие протоколы и выявить тех пациентов, которые наиболее склонны реагировать на лечение. Таким образом, можно сократить развитие болезни.

Схема лечения

Заболевание Терапевтическая схема
Волосатоклеточный лейкоз 2 МЕ / м² 3 применения в неделю до 6 месяцев
Злокачественная меланома

Индукция 20 миллионов единиц / м² IV в течение 20 минут, 5 дней в неделю в течение 4 недель . Поддерживающая доза: 10 МЕ / м² 3 раза в неделю в течение 48 недель. Отказаться от лечения, если:

  • АНК <500 / мм³ или ALT / AST> в 5 раз превышает верхний предел нормы;
  • токсичность препарата не уменьшается после снижения дозировки на 50%.

У пациентов, получающих уменьшенные дозы, сохраняются побочные реакции

Фолликулярная лимфома 5 миллионов единиц трижды в неделю до 18 месяцев в сочетании с комбинированной химиотерапией, содержащей антрациклин, у пациентов старше 18 лет
Condylomata Acuminata 1 миллион единиц впрыскивается в каждый участок поражения 3 раза в неделю, общая длительность лечения – 21 день. Терапевтический курс повторяют, если достигнуты неудовлетворительные результаты через 12–16 недель после первоначального лечения
Связанная со СПИДом саркома Капоши 30 МЕ / м² трижды в 7 дней, длительность – 16 недель. Часто требуется снижение дозы
Хронический гепатит С 3 МЕ / м² 3 раза в неделю, курс 16 недель. Если АЛТ нормализуется через 16 недель, продолжают лечение в течение 18–24 мес. Если АЛТ не нормализуется или высокий уровень РНК HCV после 16 недель, рассматривают вопрос о прекращении лечения
Острый гепатит С 5 МЕ / м² в течение 4 недель, затем 3 раза в 7 дней на протяжении 20 недель. Если развиваются серьезные побочные явления, уменьшают дозу на 50% или временно от терапии отказываются, пока нежелательные явления не ослабнут. Если непереносимость сохраняется, введение препарата прекращают навсегда

Условия продажи в аптеках

Все содержащие интерферон препараты в аптечной сети должны реализовываться, если предъявлен рецепт на латинском. Но на практике медикаменты данной группы находятся в свободной продаже. Особенно это касается мазей, спреев, гелей, суппозиториев.

Интерфероны и их роль в клинической медицине. От лечения гриппа до терапии сложных вирусных и бактериальных инфекций


АМИКСИН® — современное противовирусное и иммуностимулирующее средство; способствует образованию в организме четырех видов интерферонов (альфа, бета, гамма и лямбда).


Противовирусные препараты с иммуностимулирующей активностью могут рекомендоваться как при лечении гриппа, так и других ОРВИ. С их помощью можно сократить сроки болезни и предотвратить развитие осложнений.

Прием противовирусного препарата АМИКСИН® возможен на любой стадии простуды и гриппа по рекомендации врача.
Как принимать препарат?


В сезон простуды и гриппа прием противовирусных и иммуномодулирующих препаратов помогает снизить вероятность заболевания.
Узнать больше о профилактике…

АМИКСИН® — современный противовирусный и иммуномодулирующий препарат, используемый в комплексной терапии целого ряда вирусных инфекционных заболеваний, в том числе гриппа, ОРВИ и герпеса.

Иммуномодулирующие препараты — одни из важных составляющих комплексной терапии гриппа и других ОРВИ.
Подробнее…

Справиться с вирусными инфекциями бывает очень сложно. Но в самом нашем организме есть «встроенная» система противовирусной защиты. Это специальные вещества, интерфероны. Чтобы помочь организму справиться с болезнью, медицина создала лекарственные препараты — искусственные интерфероны и стимуляторы их синтеза, о которых пойдет речь в этой статье.

Функции и механизм действия интерферона в человеческом организме

Интерферон — это белковая молекула, которая обеспечивает противовирусный иммунитет. При этом она обладает неспецифической активностью, то есть действуют не на возбудителя какого-то конкретного заболевания, а на все вирусные частицы в целом. Если сказать обобщенно, то интерферон — универсальный защитник организма, который начинает действовать еще до того, как в работу включатся остальные звенья иммунитета. Препараты интерферона применяются даже в терапии онкологии: они подавляют опухолевый рост.

Клетки вырабатывают этот защитный белок в ответ на действие вирусов, бактерий, опухолевых клеток или продуктов их метаболизма. Стимулировать их выработку могут и лекарственные препараты — индукторы интерферона. Молекулы последних, попадая в кровь и межклеточную жидкость, связываются с рецепторами зараженных или поврежденных клеток. Они запускают сложный каскад реакций, приводящих к образованию специфических белков. В результате клетка перестает воспроизводить вирусные частицы, расщепляет их генетическую структуру, а поверхность этой клетки становится менее проницаемой для внутриклеточных паразитов.

Кроме действия на сами зараженные клетки, интерфероны стимулируют активность других звеньев иммунитета, контролируют воспалительную реакцию и даже могут защитить организм от опухолей. Это свойство активно изучают и уже используют для борьбы с некоторыми видами рака.

Виды человеческого интерферона

Молекулы интерферона отличаются между собой по генетической структуре, типу клеточных рецепторов, на которые они действуют, даже по участкам ДНК, которые кодируют их состав. Все интерфероны делят на 3 типа.

  • К первому типу относят альфа-интерферон, который имеет 13 различных структурных вариантов, а также бета-, каппа-, эпсилон- и омега-.
  • Второй тип представлен только одним типом, гамма-интерфероном.
  • Относительно недавно, в 2002 году, был открыт и третий тип молекул, лямбда-. Это отдельное семейство интерферонов, которое отличается от всех предыдущих генетическим строением и даже типом рецепторов, с которыми они взаимодействуют. Но по своей биологической активности лямбда-интерфероны очень похожи на первый тип.

Не стоит относиться к интерферонам как к панацее от всех бед. Во-первых, некоторые вирусы могут подавлять образование специфических белков внутри зараженных клеток, что значительно снижает эффективность противовирусной защиты.

Во-вторых, это лишь первая «линия обороны», которая стимулирует другие звенья иммунитета и временно приостанавливает продвижение «врага» по организму, давая время на выработку иммунных клеток и антител.

В-третьих, основной механизм действия интерферона — это подавление развития и деления. В физиологических дозах этот эффект контролирует размножение вирусов и опухолевых клеток. Но при введении значительных доз «чужеродного» вещества могут пострадать и собственные ткани организма, которые быстро обновляются. В первую очередь — клетки крови.

Поэтому прежде чем начинать лечение препаратами интерферона, нужно внимательно изучить пользу и возможный вред от их приема.

Применение аналогов интерферона в медицине

Лекарственные средства на основе интерферона доказали свою эффективность в лечении широкого круга заболеваний: герпетических инфекций, ВПЧ, острых и хронических форм вирусного гепатита, рассеянного склероза, волчанки, гриппа и многих других вирусных и бактериальных инфекций. Применяют интерферон и при терапии онкологических заболеваний, а также СПИДа. И это притом, что по меркам медицины открыли его совсем недавно. Это произошло в 1957 году при проведении опытов на мышах. Ученые обратили внимание, что животные, заразившиеся одним вирусом, становились невосприимчивы к другому вирусному заболеванию. Это явление было названо интерференцией, а вещества, которые ему способствовали — интерферонами. Оказалось, что интерфероны вырабатываются не только у мышей, но и у всех млекопитающих, в том числе у человека. Началось изучение возможности промышленного производства веществ, обладающих противовирусным эффектом.

Однако долгое время применение интерферонов было ограничено из-за несовершенства процедуры их получения. Выделять это вещество из крови человека-донора было сложно, дорого и неэффективно.

Цифры и факты
В 1 литре крови донора содержится всего 1 мкг интерферонов. Примерно такое количество этих молекул нужно для того чтобы изготовить всего одну дозу препарата. А за курс лечения тяжелых вирусных заболеваний, таких как гепатит, человек может получить около 150 доз.

В 1980 году в Японии впервые использовали для производства интерферона специально выращенную культуру лимфобластных клеток. А в 1981 году в США вместо клеток человека использовали культуру дрожжевых грибков. С помощью генной инженерии в геном ввели ген, который кодирует производство молекулы интерферона. Это позволило значительно упростить производство препарата.

По способу производства существует четыре основных разновидности этого препарата: лейкоцитарный, лимфобластоидный, рекомбинантный и пегилированный.

Лейкоцитарный интерферон получают из крови доноров. Для того чтобы усилить выработку нужных веществ, клетки предварительно стимулируют чаще всего с помощью непатогенных вирусов — таких частиц, которые не могут вызвать заболевание, но при этом воспринимаются клетками иммунной системы как «сигнальные».

После получения такой препарат очищают и концентрируют. В него могут входить все виды интерферонов и другие биологически активные вещества. Это одновременно и плюс, и минус. Преимущество такого препарата — его высокий потенциал биологического действия. Недостаток — высокая вероятность побочных эффектов при внутримышечном введении.

Лимфобластоидный интерферон получают не от человека-донора, а из культуры лимфобластных клеток, которые также обрабатывают веществами, стимулирующими иммунный ответ. Такие препараты содержат определенное соотношение различных видов интерферона и не так часто вызывают побочные эффекты.

Рекомбинантные препараты получают из культуры клеток бактерий или грибов, в которые специально внедрили участок человеческого гена. Интерферон, полученный таким образом, может немного отличаться по своему строению от «природного» человеческого. Такие препараты сохраняют противовирусную активность, но стимуляции иммунитета с их помощью добиться сложно.

Пегилированные, или ПЭГ-интерфероны — это рекомбинантные белковые молекулы, соединенные с полиэтиленгликолем. Такое соединение увеличило срок действия интерферона в организме.

К примеру
Если стандартный рекомбинантный интерферон при лечении вирусного гепатита C нужно вводить три раза в неделю, то пегилированный достаточно использовать один раз за то же время.

ПЭГ растворим в воде, не вступает в биологические реакции в организме и не вызывает иммунного ответа. При присоединении ПЭГ молекула интерферона значительно увеличивается в размерах. А это, в свою очередь, увеличивает период полувыведения препарата.

Препараты на основе интерферона: показания и противопоказания к их применению

Объединить интерфероны в однородные группы по методу получения, формам выпуска и показаниям не получится. Каждый препарат имеет свои особенности применения, эффективность при определенных заболеваниях. В зависимости от степени очистки и других факторов какие-то препараты с одним и тем же видом иммуноглобулина могут применяться только местно, а какие-то можно использовать в виде инъекций.

Например, такие препараты как «Инферон» и «Альфаферон» относят к группе лейкоцитарных интерферонов. При этом «Инферон» согласно инструкции применяют внутримышечно при неуточненных вирусных заболеваниях и для иммунотерапии. «Альфаферон» тоже вводят в мышцу, но при этом уже используют для лечения гепатита, микоза и даже некоторых онкологических заболеваний. А «Интерферон человеческий лейкоцитарный» используют для местного применения, закапывания в нос и проведения ингаляций.

Поэтому при выборе препарата интерферона стоит ориентироваться не только на общую характеристику группы веществ, но в первую очередь на рекомендации врача и инструкцию по применению конкретного препарата.

Интерферон в виде инъекций применяют при системных заболеваниях, таких как гепатит, опухоли или рассеянный склероз. Препарат в виде капель в нос подходит для лечения риносинуситов и профилактики ОРВИ. Капли в глаза помогут при конъюнктивите. Суппозитории можно использовать при многих заболеваниях, в том числе у детей. А гель подходит для смазывания носа или кожи.

Одной из наиболее однородных групп на сегодняшний момент являются пегилированные интерфероны. Существует два основных класса препаратов с доказанной эффективностью — это пегинтерферон альфа-2а и пегинтерферон альфа-2b. Представитель первого класса — «Пегасис», второго — «ПегИнтрон». Оба препарата используют подкожно, один раз в неделю и применяют только для лечения хронического вирусного гепатита В и С.

Рекомбинантный интерферон — одна из самых многочисленных по торговым наименованиям групп препаратов. Сюда относятся такие лекарства как «Реаферон», «Виферон», «Ингарон», «Интерфераль» и другие. Эти препараты имеют различные формы для местного применения и для инъекций. У каждого препарата в инструкции определен свой перечень показаний, но в целом — это вирусные и бактериальные инфекции.

Интерфероны защищают организм от вирусов, бактерий и опухолевых клеток. Они обладают сложным биологическим действием. Но современная медицина научилась создавать аналогичные вещества и использовать их. Однако подбор подходящего препарата — задача, которую может решить только врач.

Что такое индукторы интерферона

Существуют препараты, которые не просто добавляют в организм «порцию» интерферонов, а стимулируют прирост собственных защитных белков организма. Такие лекарственные средства называют индукторами интерферона. Некоторые лекарства стимулируют выработку определенных интерферонов, другие же усиливают образование всех типов интерферонов. К препаратам последней группы относится «Амиксин». Действующее вещество «Амиксина» — тилорон, основная функция которого в организме — стимулирование производства интерферона. Соединение применяется в клинической практике более 30 лет и является одним из наиболее изученных индукторов интерферона. Оно показано для профилактики и лечения гриппа и других ОРВИ, а также лечения герпетических инфекций (в составе комплексной терапии).

Преимущества этого препарата — максимум выработки интерферона уже в первые сутки от начала приема и активация четырех видов интерферонов. Увеличение концентрации интерферонов в отдельных органах может достигаться уже через 4 часа.

Все индукторы интерферона обладают индивидуальными характеристиками, показаниями и противопоказаниями. Поэтому препарат нужно выбирать внимательно, только после прочтения инструкции. С особой осторожностью нужно подходить к выбору лекарства, если его нужно принимать детям. Для детей существуют отдельные формы выпуска.

И, конечно, никогда нельзя заниматься самолечением. Любые препараты нужно принимать только по согласованию с врачом.

P.S. «Амиксин» — индуктор интерферона, который выпускает российская фармацевтическая компания ОАО «Фармстандарт-Томскхимфарм». Препарат разработан в НИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи, НИИ Гриппа.

Источники:

Препараты при гриппе и ОРВИ

В последние годы наблюдается стремительный рост производства и продаж препаратов, противовирусного действия, рекомендованных для лечения гриппа и различных ОРВИ. Несмотря на широкую рекламную кампанию, заказанную фармакологическими фабриками, существует определенная недоказанность действия лекарств описываемой группы, тем не менее, регистрировались случаи успешной терапии такими средствами. Лечение вирусных инфекций (грипп и ОРВИ) основано на применении нескольких отличных друг от друга подходов. Каждый подход подразумевает использование препаратов определенного специфического действия.

Существует ли лучшее лекарство

В связи с абсолютно разным механизмом воздействия препаратов направленных на противовирусную терапию, не существует отдельно взятого средства, которое является наилучшим для лечения. Каждый тип лекарства может оказывать разное действие у пациента. Терапия зависит от сроков заболевания, иммунного ответа заболевшего, типа вируса, наличия каких-либо аутоиммунных заболеваний (сахарный диабет, ревматоидный артрит и др.). Выбор отдельного противовирусного препарата зависит от вероятности вызова аллергических реакций.

Современное лечение (предупреждение) гриппа и ОРВИ включает следующие мероприятия:

  • проведение вакцинации в период прогнозирования вируса гриппа известного штамма (уменьшает вероятность развития);
  • прием препаратов интерферона;
  • прием противовирусных препаратов, подавляющих размножение вируса;
  • прием иммуностимулирующих средств для усиления неспецифического иммунитета.

Проведение вакцинации нужно относить скорее к предупреждающим профилактическим мерам. Вакцинация актуальна только тогда, когда известны конкретные штаммы вируса гриппа, которые предположительно могут распространяться в определенном регионе и стране в ближайшее время. Как лечебный препарат вакцины не рассматриваются, так как механизм их действия основан на предварительном образовании антител к определенным вирусам. То есть любая вакцинация эффективна тогда, когда здоровый организм получают живую или инактивированную вакцину, в результате образуются антитела, блокирующие размножение попавшего в организм вируса.

Препараты на основе интерферона, противовирусные и иммуностимулирующие средства активны в период течения заболевания. По каждому из типов лекарств нет единого научного мнения, доказанного исследованиями на широких слоях заболевшей аудитории. В основном производителями заложен гипотетический прогноз их действия относительно вируса гриппа и ОРВИ, иногда подкрепленный частными заказами лабораторных исследований их действия. Несмотря на отсутствие широких рандомизированных исследований, лечебное действие многих противовирусных лекарств подтверждается практикующими врачами.

Эффективные препараты на основе интерферона

Интерфероны являются специфическими белками, которые выделяются клетками, в результате ответной реакции на вторжение вируса. После попадания вируса в клетку и выделения интерферона запускается реакция, в ходе которой появляется невосприимчивость клеток к вирусу. Это приводит к остановке его размножения и распространению.

Одними из известных препаратов группы интерферонов являются:

  • циклоферон;
  • кипферон;
  • виферон.

Циклоферон относится к индукторам интерферона, обладает противовирусным и иммуностимулирующим действием. Отмечена и противовоспалительная способность. Одним из показаний для приема циклоферона является грипп и ОРВИ. Выпускается в виде таблеток, инъекций и линимента. Данное средство назначается взрослым и детям, которые достигли четырехлетнего возраста.

Препарат запускает индукцию альфа- и бета интерферонов, в тканях человека, что приводит к невосприимчивости клеток к действию вируса. Также замедляется его размножение. Иммуностимулирующая деятельность средства корректирует иммунный статус больного, одновременно происходит активация клеток-киллеров, которые воздействуют на пораженные вирусом клетки.

Параллельно циклоферон применяют при вирусных гепатитах, различных видов герпеса.

Противопоказания: цирроз печени, беременность, период кормления грудью, аллергическая непереносимость.

Побочные действия:

  • в основном выражены аллергическими проявлениями, которые исчезают после прекращения приема препарата.

Эффективность препарата не доказана проведением широкомасштабных исследований, отдельные клинические испытания подтверждают эффект от терапии циклофероном. Следует учитывать, что прием этого вещества усиливает действие некоторых антибиотиков. Развития аутоиммунных болезней на фоне приема циклоферона не отмечалось.

Кипферон позиционируется как противовирусный и иммуномодулирующий препарат, с противовоспалительным действием. Также отмечен антибактериальный эффект. Выпускается в виде интравагинальных и ректальных свечей.

Показания включают терапию различных заболеваний вирусной и бактериальной этиологии таких как: грипп, ОРВИ, аденовирусная инфекция, кишечные инфекции различных видов. Отдельно применяют препарат при лечении гинекологических заболеваний.

Действие кипферона основано на индукции интерферонов, в результате повышается неспецифическая иммунная реакция, приводящая к остановке размножения вирусов и их гибели.

Противопоказания: индивидуальная непереносимость, в случае беременности или лактации прием согласовывают с врачом.

Побочное действие на фоне терапии кипфероном не отмечено.

Эффективность препарата, так же как и у циклоферона не доказана рандомизированными исследованиями. Практика врачей, назначающих кипферон, утверждает о действенности этого средства при терапии вирусных инфекций, включая грипп и ОРВИ.

Виферон является комплексным противовирусным препаратом, который применяют для лечения гриппа, ОРВИ, герпетических инфекций, гепатитов. Часто, терапия вифероном проводится комплексно с другими средствами. Форма выпуска – свечи(суппозитории), мазь, гель.

Препарат содержит человеческий интерферон альфа-2b, витамин С и Е. Основой для свечей служит масло-какао.

Действие Виферона направлено на подавление вирусов, повышение собственного интерферона, отмечается повышение выработки антител и иммуномодулирующее действие.

Производитель средства отмечает эффект в сочетании с витаминами, выраженный в нормализации уровня иммуноглобулина, отсутствии побочных эффектов.

Противопоказания отсутствуют, если нет предрасположенности к аллергическим реакциям.

Побочных явлений не обнаружено.

Эффективность Виферона доказана курсом клинических исследований и испытаний в России. Исследования, которые соответствуют международным стандартам, не проводились. Практикующие педиатры и отдельные врачи доказывают эффект, появляющийся после терапии Вифероном. В некоторых случаях, при лечении заболеваний комплексным методом, удалось снижать курс антибактериальной терапии.

Противовирусные средства прямого действия

Данная группа препаратов, обладает прямым воздействием на вирус гриппа, нарушается его репликация, блокируется слияние вирусной оболочки в клетке. Также отмечается и индуктивное действие в отношении интерферона.

Антигриппин. Привычка россиян медлить с лечением гриппа и болеть «на ногах» приводит к осложнениям. Около 40% заболевших гриппом рискуют получить бронхит, пневмонию, синусит, реже – пиелонефрит, стоматит и прочие заболевания. Поэтому появление озноба, насморка и прочих симптомов, которые напоминают грипп, должно становиться для заболевающего сигналом к началу лечения.
В первые часы развития гриппа организму требуется поддержка, а больному – избавление от симптомов. При подозрении на грипп можно начать лечение с приема симптоматического средства, например, препарата европейского качества Антигриппин. Применение данного симптоматического средства в комплексном лечении гриппа поможет облегчить состояние больного и предотвратить развитие осложнений. Показаниями для приема антигриппина служат грипп и ОРВИ, сопровождающиеся повышенной температурой, ознобом, головной болью, болями в суставах и мышцах, заложенностью носа, а также болями в горле и пазухах носа. Выпускается в виде шипучих таблеток и порошка для взрослых и детей. Дозировка, назначение и длительность лечения определяются врачом.

Ингавирин это противовирусный препарат, на основе витаглутама, активен в отношении гриппа А и Б, аденовирусных инфекций. Параллельно является иммуномодулятором. Отмечается высокая противовоспалительная деятельность.

Показаниями для приема ингавирина служатгрипп различных штаммов, парагрипп, респираторные инфекции.

Выпускается в виде капсул. Дозировка и длительность лечения определяются врачом.

Противопоказания: дети до 18 лет, беременность, гиперчувствительность.

Побочные действия выражены в редких аллергических реакциях.

Эффективность от терапии ингавирином гриппа и ОРВИ не доказана. Ранее проводились исследования на действие витоглутама у пациентов с онкологическими диагнозами. Ярко выраженного действия при лечении гриппа не наблюдается. Исключение составляют случаи небольшого сокращения периода болезни.

Римантадин известен, как средство, которое на протяжении долгого времени применяется для профилактики и лечения гриппа. Является производным адамантана, для которого характерно замедление функции репродукции вируса после его проникновения в клетку. Активность римантадина обусловлена деятельностью против вируса гриппа А. Препарат получил широкую известность с 70-х годов прошлого века, при этом было проведено значительное количество исследований действия данного лекарства.

Показания: профилактика и лечение гриппа А.

Противопоказания: возраст детей до 7-ми лет, заболевание печени и почек, в том числе хронического характера, беременность.

Побочные действия: тошнота:

  • рвота;
  • боли в эпигастрии;
  • головокружение.

Отмечается повышение уровня билирубина. С осторожностью следует принимать людям пожилого возраста, в виду того, что у пациентов с артериальной гипертензией может развиться геморрагический инсульт.

Эффективность средства доказана многими клиническими испытаниями. Большинство пациентов принимающих римантадин (при условии гриппа А) отмечают существенной облегчение течения заболевания и сокращение периода болезни.

Тамифлю (осельтавмовира карбоксилат) показан при гриппе А и В и не эффективен при ОРВИ. Лекарственный препарат не является мерой профилактики, в виду его выраженной токсичности. Длительное лечение Тамифлю может привести к психическим расстройствам и нарушению функции почек. Выпускается в виде капсул и в форме порошка для суспензии.

Основное действие состоит в подавлении репликации и росте вируса. Концентрация Тамифлю для ингибирования вируса гриппа В превосходит концентрацию для вируса А.

Противопоказания: острая почечная недостаточность, аллергические реакции на препарат. В период беременности и лактации требуется дополнительная консультация врача.

Побочные действия:

  • головная боль, бессонница;
  • тошнота и рвота;
  • боль в животе, кашель;
  • у детей: острый отит, синусит, пневмония.

Эффективность и безопасность. На сегодняшний день исследования действия препарата Тамифлю не завершены. Следует знать, что средство признано токсичным, в связи, с чем остановлены массовые закупки в ведущих странах мира. Среди отзывов врачей практикующих лечение гриппа Тамифлю, преобладает положительный характер. Многими клиниками доказана эффективность средства против некоторых штаммов гриппа, но из-за высокой вероятности побочных явлений терапия этим препаратом вызывает вопросы.

Арбидол является средством, которое подавляет вирусы гриппа А и В, применяется при лечении тяжелого респираторного синдрома и тяжелых кишечных инфекциях ротавирусного типа.

Терапевтическая активность Арбидола объясняется в сокращении периода болезни и симптомов интоксикации. Вещество малотоксичное и не вызывает серьезных последствий во время лечения. Действующим веществом выступает умифеновир. Выпускается в виде капсул.

Противопоказания: не применяется в возрасте до 3-х лет и в период беременности. Повышенная чувствительность к арбидолу.

Побочные действия:

  • аллергические реакции;
  • головокружение.

Эффективность препарата не имеет четких доказательств, так как не проводились широкомасштабные исследования. Отдельные мнения врачей и пациентов распределены неоднозначно. Существуют как положительные, так и отрицательные моменты в результатах терапии.

Иммуностимуляторы

Тилорон синтетический индуктор интерферона. Вызывает его образование в организме, включая все подтипы. Выпускается в виде таблеток.

Показаниями являются: грипп всех типов, ОРВИ, вирусные энцефаломиелиты.

Противопоказания – беременность и период лактации. Нельзя проводить лечение тилороном детям до 7 лет.

Побочные действия:

  • аллергические реакции;
  • озноб;
  • головная боль.

Эффективность препарата имеет очевидное доказательство, в виду того, что это средство выпускается в течение 40 лет. Показано применение для профилактики гриппа и ОРВИ. Несмотря на это существует мнение специалистов ведущих клиник о токсичности Тилорона. Практикующие врачи несомненно видят терапевтический эффект терапии этим средством.

Кагоцел также является индуктором синтеза интерферона. Применяется для лечения гриппа всех штаммов и ОРВИ. При этом рекомендуется начинать терапию Кагоцелом в первые 24 часа от начала болезни.

Кагоцел содержит полифенол Госсипол, который весьма активен в отношении вирусов гриппа. Во время приема разовой дозы наблюдается максимальная концентрация интерферона в крови, что определяет его быстрое воздействие.

Противопоказания: беременность, кормление грудью, нельзя принимать детям до 3-х лет.

Побочные действия, в основном, выражены аллергическими реакциями.

Эффективность терапии достаточно высока. Тем не менее, западные клиники пришли к выводу, что лечение Кагоцелом может приводить к нежелательным последствиям, из-за токсичности Госсипола. Отечественные исследователи не пришли к однозначному выводу, поэтому практика лечения Кагоцелом не является редкостью. Большое значение имеет то, что этот препарат действительно оказывает положительное действие, тем самым нивелирует вероятность возможных последствий.

Цитовир 3 препарат комплексного действия, содержащий Тимоген, аскорбиновую кислоту и бендазол. Позиционируется как индуктор интерферона с действием аналогичным Кагоцелу и Тилорону. При этом предполагается, что бендазол усиливает выработку интерферона эндогенной природы. Выпускается в виде капсул, сиропа и порошка для растовра.

Показания – лечение гриппа и ОРВИ на ранних стадиях.

Противопоказания: прием детям до 1-го года (сироп), до 6-ти лет (капсулы),беременность, лактация.

Побочные действия:

  • снижение АД;
  • аллергические реакции.

Эффективность Цитовира 3 не имеет четкого представления, так как препарат не проходил рандомизированных исследований. Отзывы врачей и пациентов составляют ½ к ½. Не исключено ошибочное восприятие эффективности этого лекарства, вызванное подавлением вируса самостоятельным иммунным ответом.

Другие препараты (лавомакс, реленза, перамивир)

Терапия гриппа и ОРВИ лекарственными средствами Лавомакс и Реленза, должны учитывать что они являются аналогами рассмотренных веществ. Так, Лавомакс представляет собой заменитель Тилорона и относится к иммуностимуляторам. Реленза выступает в роли аналога Тамифлю, содержит схожее по действию вещество – занамивир, относится к противовирусным средствам.

Лечение данными лекарствами выполняется по рекомендованным схемам, при этом противопоказания и побочные действия у них приблизительно такие же как и у брендовых средств. То есть предполагается замещение Тамифлю – Релензой, а Тилорона – Лавомаксом, без потери эффекта.

Перамивир является новым лекарством, противовирусного действия. Эффект от его действия схож с Тамифлю. Требуется обратить внимание на то, что Перамивир не имеет существенной базы проведенных исследований, в связи с чем, лечение данным препаратом имеет высокую степень риска в области развития каких-либо последствий.

Стоит ли доверять рекламе или это маркетинговый ход

На сегодняшний день не существует достаточно обоснованных рекомендаций для лечения гриппа и ОРВИ описанными препаратами. Усложняет задачу о качестве подобной терапии факт приема средств в ближайшее время после начала заболевания. Также важно мнение о том, что лечение противовирусными веществами снижает естественную иммунную реакцию организма на вторжение вируса.

Интерфероны. Синтетические индукторы интерферона

Интерфероны

Указатель описаний ЛС

  • Интерферон альфа
  • Интерферон альфа-2а
  • Интерферон бета-1а

Механизм действия и фармакологические эффекты

Интерфероны и их синтетические аналоги обладают противовирусной, антипролиферативной (цитостатической, противоопухолевой) и иммуномодулирующей активностью. Интерфероны являются естественными регуляторами иммунной системы. Они активируют макрофаги, Т-лимфоциты и естественные клетки-киллеры, стимулируют синтез антител и лимфокинов.
При в/м введении время достижения Cmax составляет в среднем 9,8 ч (3—15 ч), при п/к введении — 7,8 ч (3—18 ч). Т1/2 — 10 ч при в/м введении, 8,6 ч при п/к введении. Механизмы клиренса альфа-интерферона у человека окончательно не установлены. Полагают, что интерфероны выводятся главным образом почками (70—80% дозы). Оставшаяся часть может элиминироваться путем связывания с интерфероновыми рецепторами и путем неспецифического метаболизма в печени.

Место в терапии

В стоматологической практике интерфероны и их синтетические аналоги используются для профилактики и лечения вирусных инфекций (рецидивирующего герпетического стоматита и др.).

Переносимость и побочные эффекты

Гриппоподобный синдром: редко — покраснение, боль в месте инъекции, головокружение, бессонница, тахикардия, тошнота, рвота, диарея; очень редко — депрессия, судороги, аритмия.

  • Беременность.
  • Кормление грудью.
  • Тяжелая депрессия.
  • Эпилепсия.
  • Заболевания печени в стадии декомпенсации.

Предостережения

С осторожностью следует применять при гиперчувствительности, в т.ч. к антибиотикам и компонентам куриного яйца.
С осторожностью применять у пациентов, страдающих депрессией, судорожными припадками, сердечными заболеваниями, а также при тяжелой почечной и печеночной недостаточности. Опасно использование у новорожденных.
Можно применять с ГКС, но интервал между введением препаратов должен составлять не менее 6 ч.
Интерферон альфа-2а может усиливать нейро-, гемато- и кардиотоксические эффекты ЛС, применяемых ранее или одновременно.

Синтетические индукторы интерферона

Тилорон
МНН отсутствует

  • Полудан
  • Циклоферон

Синтетические индукторы интерферона стимулируют синтез альфа-, бета- и гамма-интерферона иммунокомпетентными клетками организма (лейкоцитами, макрофагами, фибробластами, эпителиальными клетками). Нормализуют выработку интерферона, способствуют коррекции иммунного статуса организма как при иммунодефицитах, так и при аутоиммунных заболеваниях. Оказывают иммуностимулирующее, противовирусное, противовоспалительное действие.
Тилорон быстро всасывается. Незначительно связывается с белками. Легко проникает в органы, ткани и биологические жидкости. 99% введенного средства экскретируется почками (в неизмененном виде) в течение 24 ч.
Тилорон не кумулирует даже при длительном применении.
В стоматологической практике синтетические индукторы интерферона используются при рецидивирующем герпетическом стоматите.

  • Аллергические реакции.
  • Редко — диспепсические явления, озноб.
  • Гиперчувствительность.
  • Беременность.
  • Кормление грудью.
  • Декомпенсированный цирроз печени.
  • Детский возраст (до 4 лет — циклоферон, до 14 лет — тилорон).

Синтетические индукторы интерферона совместимы с антибактериальными, противогрибковыми и противовирусными средствами, витаминами, иммуномодуляторами.

Примеры ТН интерферонов и синтетических индукторов интерферона, зарегистрированных в РФ

МНН

Синонимы

Интерферон альфа

Альфаферон

Интерферон альфа-2а

Роферон-А

Интерферон бета-1a

Авонекс, Ребиф

Тилорон

Амиксин

Нет

Полудан

Нет

Циклоферон

Г.М. Барер, Е.В. Зорян

Опубликовал Константин Моканов

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *